過(guò)敏反應(yīng)動(dòng)物模型的建立及在雙黃連注射過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)中的應(yīng)用.pdf

1、過(guò)敏反應(yīng)動(dòng)物模型對(duì)于藥物的過(guò)敏反應(yīng)研究來(lái)說(shuō)十分重要，是篩選藥物中過(guò)敏原的前提，也是預(yù)防臨床藥物過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生的依據(jù)。但現(xiàn)有的動(dòng)物模型檢測(cè)過(guò)敏反應(yīng)的靈敏性和準(zhǔn)確性并不理想，無(wú)法對(duì)藥物的臨床過(guò)敏反皮進(jìn)行有效預(yù)測(cè)。如何提高動(dòng)物模型的檢測(cè)靈敏性和預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率是當(dāng)前過(guò)敏反應(yīng)研究亟待解決的問(wèn)題。雙黃連注射劑作為中藥注射劑的一個(gè)代表藥物，近期屢次出現(xiàn)嚴(yán)重過(guò)敏反應(yīng)，并已引起社會(huì)的高度重視。但雙黃連注射劑生產(chǎn)工藝不穩(wěn)定、成分復(fù)雜且含有過(guò)敏原含量較少，這都對(duì)過(guò)

2、敏反應(yīng)動(dòng)物模型的建立提出更高要求。
　　 本研究通過(guò)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方案和優(yōu)選檢測(cè)指標(biāo)，嘗試建立大鼠、豚鼠和小鼠等多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的過(guò)敏反應(yīng)模型，并分別應(yīng)用于雙黃連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)，以期建立合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物過(guò)敏反應(yīng)模型，為中藥注射劑的臨床前過(guò)敏反應(yīng)評(píng)價(jià)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 1.大鼠過(guò)敏反應(yīng)模型的建立及應(yīng)用
　　 目的：尋找過(guò)敏反應(yīng)敏感的大鼠種屬，建立完善的過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)模型，并應(yīng)用于雙黃連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)。方法：比較Wi

3、star大鼠、SD大鼠和BN大鼠在過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)中的敏感性，通過(guò)加用佐劑、皮下注射和致敏五次等方法提高大鼠模型檢測(cè)的靈敏度，考察血清總IgE、特異性IgE、細(xì)胞因子、全身和局部癥狀、過(guò)敏介質(zhì)、血壓以及病理學(xué)檢查等作為過(guò)敏反應(yīng)判定指標(biāo)的可行性，并應(yīng)用于雙黃連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)。結(jié)果：相比Wistar大鼠和SD大鼠，BN大鼠更容易對(duì)較少致敏劑量的卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)方案改進(jìn)，BN大鼠模型對(duì)OVA的最低

4、致敏劑量可達(dá)0.01mg，并可利用總IgE、特異性IgE、IL-4、癥狀和過(guò)敏介質(zhì)等多項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)出雙黃連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)潛能。結(jié)論：BN大鼠模型能靈敏、準(zhǔn)確和全面地對(duì)少量過(guò)敏原進(jìn)行檢測(cè)，并能對(duì)雙黃連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)有效檢測(cè)，有望應(yīng)用于雙黃連注射劑中過(guò)敏原成分篩選和其它中藥注射劑的過(guò)敏反應(yīng)研究。
　　 2.豚鼠過(guò)敏反應(yīng)模型的建立及應(yīng)用
　　 目的：建立一種靈敏、定量的豚鼠過(guò)敏反應(yīng)模型，并應(yīng)用于雙黃連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)。方

5、法：在癥狀觀察的基礎(chǔ)上，通過(guò)確定最佳激發(fā)時(shí)間、增加過(guò)敏介質(zhì)檢測(cè)和病理學(xué)檢查的內(nèi)容，提高豚鼠過(guò)敏反應(yīng)模型檢測(cè)的靈敏性和定量性，并應(yīng)用于雙黃連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)檢測(cè)。結(jié)果：相對(duì)文獻(xiàn)報(bào)道的0.3 mg的豚鼠最低致敏劑量，該豚鼠模型對(duì)OVA的最低致敏劑量可達(dá)到0.01mg；但該豚鼠模型對(duì)雙黃連注射劑只表現(xiàn)出很弱的過(guò)敏反應(yīng)癥狀，且激發(fā)后未發(fā)現(xiàn)過(guò)敏介質(zhì)釋放和肺部病理學(xué)異常。結(jié)論：豚鼠過(guò)敏反應(yīng)模型對(duì)OVA等大分子過(guò)敏原的檢測(cè)十分敏感，但不能有效檢測(cè)雙黃

6、連注射劑的過(guò)敏反應(yīng)，提示雙黃連注射劑中的過(guò)敏成分可能為小分子過(guò)敏原；該豚鼠模型可作為BN大鼠模型檢測(cè)中藥注射劑過(guò)敏反應(yīng)的一種輔助手段。
　　 3.小鼠過(guò)敏反應(yīng)模型的建立及應(yīng)用
　　 目的：建立一種小鼠過(guò)敏反應(yīng)模型，并應(yīng)用于雙黃連注射劑過(guò)敏反應(yīng)的檢測(cè)。方法。BALB/c小鼠通過(guò)皮下注射致敏，利用抗體檢測(cè)、全身反應(yīng)觀察、足部滲透性試驗(yàn)和病理學(xué)檢查等指標(biāo)來(lái)判定過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生，初步建立小鼠過(guò)敏反應(yīng)模型，并應(yīng)用于雙黃連注射劑的過(guò)敏