地拉羅司通過Wnt信號通路抑制肺癌A549細胞及其機制的研究.pdf

1、分類號：R7342密級：內(nèi)部2年學位類別：科學學位口專業(yè)學位團學校代碼：10062學號：2011601070學科門類：醫(yī)學夭肄譬科袁等Ill萋毳黼JI圈嬲毫O|霉；蠢IlI辣麓I垤黯11警博士學位論文DOCToRALDISSERTATIoN論文題目：地拉羅司通過Wnt信號通路抑制肺癌A549細胞，及其機制的研究TITLEMechanismsonWntSignalingPathwayInhibitingtheProliferationin

2、HumanLungAdenocarcinomaA549CellsbyDeferasirox一級學科：臨床醫(yī)學二級學科：外科學胸心外科論文作者：梁吉祥指導教師：張遜導師組成員：孫大強徐醫(yī)軍天津醫(yī)科大學研究生院二O一四年五月天津醫(yī)科大學博士學位論文中文摘要目的：1通過研究地拉羅司對A549細胞增殖、凋亡以及鐵代謝相關(guān)基因及其表達產(chǎn)物的影響，從細胞水平探討鐵螯合劑對肺癌增殖的作用及機制。2采用接種裸鼠，創(chuàng)建異種移植瘤模型，研究地拉羅司對A54

3、9細胞致瘤能力的影響，探討地拉羅司對肺癌生長的影響。3觀察不同濃度的地拉羅司在體外對肺癌A549細胞核蛋白pcatenin和信號通路下游cmyc基因表達的調(diào)控，探討地拉羅司可能存在的抑制肺癌細胞增殖的分子學機制。方法：1。常規(guī)傳代細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)肺腺癌細胞A549，分別以不同濃度(0320pM)的地拉羅司干預細胞生長24和48h后，MTT法檢測肺癌細胞的生長抑制情況，應(yīng)用流式細胞儀檢測細胞中凋亡率的變化，分析地拉羅司對細胞凋亡的影響，分

4、析藥物濃度和細胞增殖抑制率之間的關(guān)系。RT—PCR檢測各組細胞鐵代謝相關(guān)指標Tf、TfRl、Fn、FNP的mRNA水平。24～5周雌性BALB／C(nu／nu)鼠分為對照組和實驗組各8只，皮下植入肺癌A549細胞，腫瘤體積達100mm3后，實驗組隔日用地拉羅司40mg／kg，對照組采用等量生理鹽水連續(xù)灌胃，治療3周后處死。觀察成瘤時間、瘤體平均體積、平均瘤重和血液生化指標。3，不同濃度地拉羅司作用后，RT—PCR檢測各組細胞Cmyc、1

5、3catenin基因表達的mRNA水平。Westernblot檢測各組細胞cmyc、13catenin的蛋白表達，進而探討地拉羅司的分子學機制。爭士甲三口木：l，不同濃度地拉羅司對A549細胞生長有抑制作用，與對照組比較差異具有統(tǒng)計學意義舊0001)。隨著濃度的增加，抑制增殖作用增強。隨著時間延長，地拉羅司80pm／L、160pm／L、3209m／L組48h抑制增殖作用強于24h，48h抑制增殖的作用與24h相比，差異有統(tǒng)計學意義(P0