KCTD1抑制經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的機(jī)制研究.pdf

1、經(jīng)典Wnt信號(hào)通路調(diào)控正常胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)，它的異常激活會(huì)導(dǎo)致人類(lèi)腫瘤的發(fā)生。β連環(huán)蛋白(β-catenin)是Wnt信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)控因子，然而調(diào)控β-catenin蛋白穩(wěn)定性的分子機(jī)制尚不完全清楚。我們近期的研究表明鉀離子通道蛋白四聚體1(KCTD1)強(qiáng)烈抑制TCF/LEF的轉(zhuǎn)錄活性。通過(guò)co-IP和GST pull-down實(shí)驗(yàn)證實(shí)KCTD1蛋白和β-catenin蛋白在體內(nèi)、體外存在相互作用，并且我們確定了兩蛋白相互作用

2、的區(qū)域，即β-catenin的1-9armadillo重復(fù)基序和KCTD1的BTB結(jié)構(gòu)域，特別是Ala-30和His-33位點(diǎn)。免疫熒光分析表明KCTD1促進(jìn)β-catenin蛋白在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的積累。蛋白穩(wěn)定性分析證實(shí)KCTD1在HeLa細(xì)胞內(nèi)促進(jìn)β-catenin蛋白泛素化降解，而蛋白酶體抑制劑MG132可以抑制KCTD1介導(dǎo)的β-catenin蛋白降解。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)KCTD1介導(dǎo)的β-catenin降解依賴(lài)于酪蛋白激酶1(CK1)