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文檔簡介
1、方法:利用飲水加入不同濃度(5mg/L和50mg/L)氟化鈉(NaF)進(jìn)行大鼠染氟實(shí)驗(yàn),同時(shí)設(shè)置正常組,實(shí)驗(yàn)期8個(gè)月。實(shí)驗(yàn)中觀察大鼠氟斑牙的發(fā)生情況,使用電極選擇法測定尿氟及骨氟含量。確定慢性氟中毒模型的復(fù)制成功。HE(Hematoxylin-eosin,蘇木素-伊紅)染色觀察股骨骨組織的形態(tài)學(xué)變化;ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,酶聯(lián)免疫吸附法)檢測大鼠血清中BALP含量(Bone A
2、lkaline Phosphatase,骨堿性磷酸酶)和TRACP-5b(tartrate-resistant acid phosphataseform5b,抗酒石酸酸性磷酸酶)含量;IHC(Immunohistochemistry,免疫組織化學(xué))方法檢測股骨成骨細(xì)胞Wnt3a和β-catenin蛋白表達(dá)水平;ISH(in situ hybridization,原位雜交)方法檢測股骨成骨細(xì)胞Wnt3a和β-catenin mRNA表達(dá)水
3、平。
結(jié)果:1、染氟大鼠出現(xiàn)不同程度氟斑牙損害,以高氟組最為嚴(yán)重,對(duì)照組無氟斑牙發(fā)生,各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);尿氟及骨氟含量隨染氟濃度的增加而逐漸增加;表明慢性氟中毒大鼠模型復(fù)制成功。
2、 HE結(jié)果顯示慢性氟中毒大鼠骨密度增加,與正常組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表現(xiàn)為骨皮質(zhì)增厚,骨小梁增寬、排列緊密。骨密度隨著氟濃度升高而增加。
3、ELISA檢測結(jié)果顯示在氟中毒組BALP升
4、高,與正常組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與低氟組比較,高氟組含量升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與正常組比較,低氟組TRACP-5b含量增加顯著,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高氟組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但與低氟組比較,TRACP-5b含量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4、免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,氟中毒組 Wnt3a蛋白和β-catenin蛋白表達(dá)均升高,與正常組比較,差異
5、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高氟組 Wnt3a蛋白質(zhì)和β-catenin蛋白表達(dá)高于低氟組表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);統(tǒng)計(jì)Wnt3a蛋白和β-catenin蛋白表達(dá)相關(guān)性,Wnt3a蛋白隨著β-catenin蛋白兩者的表達(dá)正相關(guān)性(R=0.856,P<0.05)。
5、原位雜交法實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,氟中毒組Wnt3a mRNA和β-catenin mRNA表達(dá)均升高,與正常組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);高氟
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