2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩54頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、J亞群禽白血病病毒(Subgroup J Avian leukosis Virus,ALV-J)是上世紀(jì)90年代從肉用型雞群中分離的一種由反轉(zhuǎn)錄病毒引起的高度傳染性的新型禽白血病病毒,主要引起骨髓細(xì)胞瘤。1999年我國首次從白羽肉雞中分離出該病毒。目前已出現(xiàn)大量在我國地方品系雞群以及蛋雞中關(guān)于ALV-J感染的報(bào)道。ALV-J的廣泛傳播,已給我國養(yǎng)禽業(yè)造成了不可估量的潛在風(fēng)險(xiǎn)和經(jīng)濟(jì)損失。為控制和預(yù)防ALV-J的流行,保護(hù)優(yōu)良地方品系雞,國

2、家開始對地方種雞實(shí)施種群凈化的戰(zhàn)略決策。但由于我國種雞品系和種群數(shù)量大、飼養(yǎng)不規(guī)范和飼養(yǎng)密集等特點(diǎn),需要繼續(xù)加強(qiáng)對ALV-J的研究,并探索更有效的防治措施以降低各雞群的ALV-J感染率和發(fā)病率。疫苗預(yù)防對于動物性傳染病的控制,一直是一種行之有效的方法,但針對ALV-J,至今仍無有效的疫苗可在生產(chǎn)中加以應(yīng)用。因此,ALV-J疫苗的研制顯得尤為迫切。
  本研究根據(jù)已發(fā)表的ALV-J囊膜蛋白gp85基因序列,設(shè)計(jì)一對特異性引物。從分離

3、自我國肉雞樣品的ALV-JNX0101毒株cDNA中擴(kuò)增得到目的基因,并通過PCR及測序鑒定。將gp85目的基因連接至Pet28a原核表達(dá)載體,并將鑒定確實(shí)的重組表達(dá)載體Pet28a-gp85轉(zhuǎn)化入E.coli Rosetta(DE3)菌株,IPTG適溫誘導(dǎo)后大量收獲穩(wěn)定表達(dá)的菌體蛋白,并對包涵體蛋白進(jìn)行Ni柱純化。使用ALV-J單克隆抗體,通過蛋白印跡(Western-blot)方法對重組表達(dá)蛋白進(jìn)行特異性驗(yàn)證。將純化重組蛋白與不同佐

4、劑(MF59佐劑,R848佐劑和弗氏佐劑)通過超聲進(jìn)行乳化,制備多種ALV-J重組蛋白佐劑疫苗。疫苗中重組gp85蛋白含量為600μg/dose。根據(jù)免疫佐劑種類的不同,將96只海蘭褐雛雞隨機(jī)分為八組,即空白對照組、gp85-PBS組、gp85-PBS對照組、gp85-MF59組、gp85-雷西莫特組、gp85-弗氏佐劑組、gp85-MF59+雷西莫特組和gp85-弗氏佐劑+雷西莫特組。別于14和21日齡,通過腿部肌肉注射對雞群進(jìn)行免疫

5、和一次加強(qiáng)免疫。每周通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)檢測血清中ALV-J抗體IgG水平,加強(qiáng)免疫后進(jìn)行攻毒試驗(yàn)。通過病毒血癥的檢測,評價(jià)佐劑重組蛋白疫苗的免疫保護(hù)效果。
  結(jié)果顯示:除對照組外,各實(shí)驗(yàn)組均可誘導(dǎo)產(chǎn)生一定水平的陽性抗體(S/P>0.6);二次免疫可以增強(qiáng)免疫效果,使陽性抗體水平進(jìn)一步提高,維持時(shí)間進(jìn)一步延長;與只免疫gp85蛋白組相比,含佐劑疫

6、苗誘導(dǎo)的抗體反應(yīng)更加強(qiáng)烈,特別是在早期誘導(dǎo)強(qiáng)度和抗體反應(yīng)持續(xù)時(shí)間上較顯著。MF59佐劑疫苗誘導(dǎo)的抗體水平(急劇增加,并保持時(shí)間最長)最高。更重要的是,結(jié)果表明免疫記憶可以被MF59/R848佐劑疫苗更迅速地調(diào)動起來。且免疫后三個(gè)月內(nèi),高滴度的抗體水平仍可以在MF59/R848免疫組中被檢測到。
  通過腹腔注射方法,將1mL102.4 TCID50 NX0101株ALV-J細(xì)胞上清液接種于上述各試驗(yàn)組雞只(空白對照組隨機(jī)挑取一半數(shù)

7、量),于5周齡進(jìn)行攻毒,每7天無菌采集一次血漿進(jìn)行病毒血癥的檢測。結(jié)果顯示:各組的保護(hù)率分別為gp85+PBS組為16.7%;gp85+MF59+R848佐劑組和gp85+弗氏佐劑組為50%;gp85+MF59佐劑組為66.7%;gp85+R848佐劑組為83.3%。這些結(jié)果表明,R848佐劑疫苗免疫保護(hù)作用最強(qiáng)。同時(shí),通過與偏于激活TH2型免疫途徑的MF59佐劑的效果進(jìn)行比較,R848作為TH1型免疫調(diào)節(jié)劑具有更好地保護(hù)力,推測外泌體

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論