HCMV感染單核細(xì)胞誘導(dǎo)HLA-G異構(gòu)體的差異表達(dá)及對(duì)其功能的影響.pdf

1、論文題目：旦￡叢y璧鎏望撻細(xì)胞透昱旦墜△：g昱撿體的羞昱麥達(dá)及對(duì)甚功能的髭響論文答辯日期：20150512溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文HCMV感染單核細(xì)胞誘導(dǎo)HLAG異構(gòu)體的差異表達(dá)及對(duì)其功能的影響中文摘要目的：通過(guò)HCMV感染THP1單核細(xì)胞，研究其對(duì)HLAG異構(gòu)體的差異表達(dá)、細(xì)胞岡子的分泌及細(xì)胞凋亡的影響，初步探討HCMV逃逸機(jī)體免疫應(yīng)答的機(jī)制。方法：1HCMVADl69株感染THP1細(xì)胞，以THP1細(xì)胞作為對(duì)照。RT—PCR和West

2、ernBlot分別檢測(cè)HLA—G異構(gòu)體mRNA和蛋白的表達(dá)；Flowcytometry檢測(cè)THP1細(xì)胞表面HLAG、ILT2和ILT4的表達(dá)；并采用ELISA檢測(cè)sHLA—G水平。2用RTPCR檢測(cè)HCMVADl69株感染THP1細(xì)胞IL6、TNF0【、IL—10和1FN吖mRNA的表達(dá)；ELISA檢測(cè)THP1細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL一6、TNFa、IL10和IFN一丫水平。3HCMVADl69株感染THP1細(xì)胞，利用DCFHDA法檢測(cè)TH

3、P一1細(xì)胞內(nèi)活性氧，AnnexinVFITC／PI檢測(cè)THP一1細(xì)胞的凋亡率；并用WesternBlot檢測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl2、Bax、Caspase3和p38MAPK。結(jié)果：1HCMV感染THP1細(xì)胞對(duì)HLAG異構(gòu)體表達(dá)的影響HCMV感染THP1細(xì)胞1～5d后，HLAG異構(gòu)體mRNA的表達(dá)以HLAG1、G3、G4和G5為主，感染后第1天HLAG1、一G3、G4和G5mRNA的表達(dá)明顯上調(diào)，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸D01

4、)。HLAG異構(gòu)體蛋白的表達(dá)以HLA—G1和HLA—G5為主，感染后第1天，HLAG1和HLAG5蛋白的表達(dá)明顯上調(diào)，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸O01)。細(xì)胞表面HLAG、ILT2和ILT4的表達(dá)在感染后第1天明顯上調(diào)，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO01)，感染1天后細(xì)胞表面HLAG、ILT2和ILT4的表達(dá)下降；到感染后第4天，細(xì)胞表面HLAG的表達(dá)出現(xiàn)下調(diào)，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005)。sHLAG水平在感