染料木素抑制Aβ誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元毒性的分子機(jī)制研究.pdf

1、染料木素(Genistein，Gen)是大豆異黃酮苷元(soy isoflavone aglycones)中的主要成份，廣泛存在于豆科植物中。Gen亦稱植物激素，具有較強(qiáng)的生理活性，它與內(nèi)源性雌激素有相似的分子結(jié)構(gòu)，和雌激素受體有一定的親和力，在人體內(nèi)可與雌激素受體結(jié)合發(fā)揮弱雌激素樣作用和抗雌激素活性。有研究表明，Gen對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞具有明顯的保護(hù)作用，對(duì)老年性神經(jīng)退行性疾病具有一定的預(yù)防和治療作用。本課題組前期動(dòng)物水平研究結(jié)果表明，異黃

2、酮苷元能有效改善阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠SAMP8學(xué)習(xí)記憶能力，提高SAMP8小鼠抗氧化能力，降低SAMP8小鼠皮層AchE活力和海馬組織中的β-分泌酶活力，從而減輕Aβ過量積聚所導(dǎo)致的神經(jīng)毒性，保護(hù)SAMP8小鼠海馬組織。Gen的保護(hù)機(jī)制可能與雌激素相似，與蛋白激酶C (Protein kinase C，PKC)通路密切相關(guān)。本論文將進(jìn)一步在細(xì)胞水平就異黃酮苷元主要活性成份Gen的神經(jīng)保護(hù)作

3、用的分子機(jī)制進(jìn)行探討。
　　 本論文將采用原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，以神經(jīng)毒素β-淀粉樣肽(Aβ25-35)誘導(dǎo)大鼠原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞損傷，構(gòu)建AD細(xì)胞模型，以不同濃度Gen預(yù)孵育后加入Aβ25-35共同作用，檢測海馬神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)變化和存活率，研究Gen對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用；并測定神經(jīng)元細(xì)胞α、β-分泌酶活性及蛋白激酶C(PKC)的活性及含量的改變，以及PKC抑制劑(Myristoylated Protein Kinase C

4、Peptide Inhibitor，Myr)的影響作用，探討Gen抑制Aβ誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞毒性的分子機(jī)制。結(jié)果顯示，25μmol/L Aβ25-35可用于構(gòu)建細(xì)胞毒性模型；Gen能顯著改善Aβ誘導(dǎo)的毒性細(xì)胞的形態(tài)和提高細(xì)胞存活率，0.375μg/mL的Gen產(chǎn)生最大的保護(hù)作用；Gen具有上調(diào)α-分泌酶活性和下調(diào)β-分泌酶活性，提高PKC的活性和PKCα表達(dá)的作用，Gen的激活作用可被PKC抑制劑Myr部分阻斷。結(jié)果表明，Gen對(duì)Aβ