基于藥代動(dòng)力學(xué)機(jī)制的雙參通冠方配伍關(guān)系的研究.pdf

1、中藥復(fù)方成分復(fù)雜，進(jìn)入體內(nèi)后眾多成分共同對(duì)機(jī)體產(chǎn)生作用。對(duì)于復(fù)方配伍前后成分之間的相互作用，主要研究方向有中藥化學(xué)、藥效學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)，除此之外，從藥物代謝動(dòng)力學(xué)方面研究，是非常新穎且不可或缺的。中藥藥代動(dòng)力學(xué)，著眼于機(jī)體對(duì)中藥成分的處置過程，從中藥和生物體的相互作用過程，考察藥物所經(jīng)歷的一系列含量和性質(zhì)的變化，從而對(duì)中藥配伍從動(dòng)力學(xué)和藥物代謝方面進(jìn)行分析，這不僅可以發(fā)現(xiàn)藥物與藥物之間的相互作用，還能夠指導(dǎo)臨床合理用藥。復(fù)方藥物配伍后，

2、主要有效成分在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過程發(fā)生變化，這是從藥動(dòng)學(xué)的角度考察復(fù)方配伍關(guān)系;主要成分在體內(nèi)的代謝過程因也可能發(fā)生變化，這則是從藥物代謝學(xué)的角度闡釋中藥復(fù)方配伍關(guān)系的研究。本課題旨在運(yùn)用藥物代謝動(dòng)力學(xué)理論和實(shí)驗(yàn)方法，考察組分中藥雙參通冠方(SSTG)不同配伍組對(duì)大鼠機(jī)體處置過程的影響。主要從配伍對(duì)入血成分藥動(dòng)學(xué)行為的影響和配伍對(duì)肝臟代謝酶CYP450的影響兩個(gè)方面進(jìn)行研究。主要研究內(nèi)容如下:
　　第一部分基于藥物動(dòng)力學(xué)的雙參通冠

3、方配伍關(guān)系的研究
　　第一章雙參通冠方中主要成分在大鼠血漿中的LC-MS/MS分析方法建立
　　目的:建立人參皂苷、丹參酚酸和延胡索生物堿在大鼠血漿中主要成分的LC-MS/MS分析方法。方法:將人參皂苷類成分分為兩組，A組: Rg1、F1和Rh1，B組Re、Rb1、Rd、Rb2/3、Rc、Rf。將生物堿類成分分為兩組，A組:延胡索乙素、小檗堿、巴馬汀、脫氫紫堇堿、α-別隱品堿、海罌粟堿和四氫藥根堿，B組:延胡索甲素、甲基黃連

4、堿、表小檗堿、黃連堿、藥根堿、四氫小檗堿和原阿片堿。將丹參酚酸類成分分為兩組，A組:SAA、SAB和LA， B組:SAC和RA。皂苷和生物堿類成分所用色譜柱為SymmetryLuna C18柱(150mm×2.1mm，L×I.D)，酚酸類成分所用色譜柱為Luna C18柱(50mm×4.6mm， L×I.D)。離子源為ESI源，掃描方式選擇多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)方式。結(jié)果:經(jīng)方法學(xué)確證，該方法特異性、精密度和準(zhǔn)確度、基質(zhì)效應(yīng)、穩(wěn)定性和回收

5、率等考察項(xiàng)目皆符合相關(guān)要求。線性范圍:A組人參皂苷為0.625～80μg·L-1，B組人參皂苷為1.25～160μg·L-1;A組生物堿為0.195～25μg·L-1，B組生物堿為0.781～100μg·L-1;A組酚酸為0.78～100μg·L-1，B組酚酸成分為0.39～50μg·L-1。
　　第二章雙參通冠方配伍對(duì)入血成分在大鼠血漿中的藥動(dòng)學(xué)影響研究
　　目的:明確不同配伍給藥組，雙參通冠方中人參皂苷類、延胡索生物堿類

6、和丹參酚酸類成分在大鼠體內(nèi)血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)和主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。根據(jù)入血成分的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，比較單味藥組與全方組各成分藥動(dòng)學(xué)行為的不同，從藥動(dòng)學(xué)角度闡釋雙參通冠方配伍機(jī)理。方法:利用第一部分建立的各成分在大鼠血漿中的LC-MS/MS分析方法，對(duì)全方組、人參組、丹參組、元胡組、人參+丹參組、人參+元胡組和丹參+元胡組大鼠血漿中入血成分進(jìn)行測定。采用Winnonlin6.0藥動(dòng)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得到各組藥動(dòng)學(xué)參數(shù)后，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件S

7、PSS19.0進(jìn)行Wilconxon秩和檢驗(yàn)。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)對(duì)雙參通冠方中28個(gè)入血成分進(jìn)行了不同配伍的考察，在當(dāng)前給藥劑量下僅能得到9種成分完整的藥時(shí)曲線，分別為人參皂苷Rb1、Rd、Rb2/3、Rc，延胡索乙素、脫氫紫堇堿、四氫藥根堿、丹酚酸B和紫草酸。結(jié)果表明不同配伍對(duì)這些入血成分的AUC值無明顯影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　第二部分基于藥物代謝酶的雙參通冠方配伍關(guān)系的研究
　　目的:應(yīng)用課題組前期建立的Cocktail探

8、針底物法評(píng)價(jià)體系，考察雙參通冠方不同配伍組連續(xù)給藥后對(duì)大鼠體內(nèi)CYP450酶活性的影響。初步探討復(fù)方配伍與體內(nèi)藥物代謝酶的相互關(guān)系，尋找復(fù)方相對(duì)于單味藥潛在的優(yōu)越性。從藥代動(dòng)力學(xué)的代謝環(huán)節(jié)闡釋中藥復(fù)方配伍機(jī)制的合理性。方法:選取5種FDA建議考察的肝臟代謝酶:CYP1A2、 CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4。將相應(yīng)的探針底物混合成Cocktail探針底物。分全方組、人參組、丹參組、元胡組和空白組，進(jìn)行為期15天的