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1、目的:研究兩種來源的人胎盤間充質(zhì)干細胞 CD200的表達差異在小鼠皮膚移植免疫調(diào)節(jié)中的作用及作用機制,為臨床上選擇更好的抑制免疫排斥的干細胞提供一定理論依據(jù)。
方法:分離兩種來源細胞;流式細胞術(shù)檢測間充質(zhì)干細胞表面標志分子等的表達情況;流式細胞抗體中和高表達CD200分子的細胞、攜帶CD200基因的腺病毒載體及腺病毒空載體分別轉(zhuǎn)染低表達CD200分子的細胞,將等量PBS及上述處理過的細胞通過尾靜脈注射入將ICR乳鼠皮膚移植至C
2、57BL/6背部建立的皮膚移植免疫排斥模型小鼠體內(nèi),統(tǒng)計各組皮膚存活時間;術(shù)后第7天,HE染色法觀察小鼠移植部位炎性細胞浸潤情況;RT-PCR法檢測小鼠脾臟中IL-17、IFN-γ、TNF-α、IL-10基因的相對表達量;眼眶靜脈取血,檢測各組小鼠血液中白細胞的含量;ELISA法檢測血液中相應(yīng)免疫因子的含量。
結(jié)果:胎兒側(cè)來源細胞 CD200陽性率明顯高于母體側(cè)。與 PBS組比較:mPMSC組和fPMSC組移植皮膚存活時間均明
3、顯延長;與fPMSC+anti-CD200組比較:fPMSC組移植皮膚存活時間明顯延長;與mPMSC+腺病毒空載體組比較:mPMSC+CD200腺病毒組移植皮膚存活時間明顯延長。HE結(jié)果顯示:細胞移植組炎性細胞的浸潤數(shù)量明顯少于PBS組。RT-PCR結(jié)果顯示:與PBS組比較:mPMSC組IL-17、IFN-γ、TNF-α的相對表達量,fPMSC組TNF-α的相對表達量明顯降低,fPMSC組IL-10的相對表達量明顯升高;與mPMSC組比
4、較:fPMSC組IFN-γ、TNF-α的相對表達量均明顯降低;與 fPMSC組比較:fPMSC+Anti-CD200組 IL-17、TNF-α的相對表達量,fPMSC+Anti-CD200組IFN-γ的相對表達量均明顯升高;與mPMSC+CD200腺病毒載體轉(zhuǎn)染組比較:mPMSC+腺病毒空載體轉(zhuǎn)染組TNF-α、IFN-γ的相對表達量均明顯升高,mPMSC+腺病毒空載體轉(zhuǎn)染組 IL-17的相對表達量明顯升高,mPMSC+腺病毒空載體轉(zhuǎn)染組
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