EGCG降低人肺癌A549-DDP細(xì)胞的多藥耐藥性和機(jī)制的初步研究.pdf

1、，一l8l53南華大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。作者簽名：眷專趕沙7年j峒舢南華大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位

2、論文是本人在南華大學(xué)攻讀——(博／碩)士學(xué)位期間在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的學(xué)位論文。本論文的研究成果歸南華大學(xué)所有，本論文的研究內(nèi)容不得以其它單位的名義發(fā)表。本人同意南華大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保留學(xué)位論文；學(xué)?？筛鶕?jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文。同意學(xué)校將論文加入《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并按《中

3、國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程》規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。同意授權(quán)中國科學(xué)信息技術(shù)研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。對(duì)于涉密的學(xué)位論文，解密后適用該授權(quán)。作者簽名：嵴抄矽P導(dǎo)師簽名：1呦帥EG0(3降低人肺癌A549／DDP細(xì)胞的多藥耐藥性和機(jī)制的初步研究碩士研究生：蕭赦導(dǎo)師：羅招陽教授中文摘要目的：探討EGCG對(duì)肺癌耐藥細(xì)胞株A549／DDP耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制。方法：MTT法檢測(cè)

4、EGCG對(duì)A549／DDP細(xì)胞的非毒性劑量以及EGCG對(duì)A549／DDP細(xì)胞藥物敏感性的影響；ICPMS法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)順鉑濃度的變化；AO／EB染色法檢測(cè)EGCG聯(lián)合順鉑處理A549／DDP細(xì)胞前后凋亡的形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡率；RTPCR方法觀察EGCG作用前后耐藥基因GSTn、MRP2mRNA表達(dá)的變化；WesternBlot方法觀察EGCG作用前后耐藥蛋白GSTn、MRP2、Survivin表達(dá)的變化。結(jié)果：MTT比色法顯示

5、EGCG在低于7231xg／ml時(shí)對(duì)A549／DDP細(xì)胞的抑制率低于10％；20rtg／ml、40Jtg／ml、601xg／mlEGCG均可增加細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性；ICPMS法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)順鉑濃度隨著EGCG濃度的增大逐漸增高；熒光顯微鏡下觀察到EGCG處理后細(xì)胞體積縮小，核固縮，呈典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞術(shù)顯示，20pg／ml、401xg／ml、601xg／mlEGCG聯(lián)合順鉑處理細(xì)胞24小時(shí)后，凋亡率逐漸增加，說明EGCG聯(lián)合順

6、鉑能夠促進(jìn)肺癌耐藥細(xì)胞株A549／DDP凋亡；RTPCR方法觀察EGCG作用前后耐藥基因GST；t、MRP2mRNA表達(dá)均減弱；Westernblot方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，不同濃度的EGCG處理細(xì)胞24小時(shí)后GSTx、MRP2、Survivin蛋白表達(dá)均下調(diào)。結(jié)論：EGCG能夠部分逆轉(zhuǎn)A549／DDP細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性，其機(jī)制可能與降低GSTn、MRP2表達(dá)從而增加了細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度，下調(diào)Survivin蛋白的表達(dá)誘導(dǎo)凋亡有關(guān)。關(guān)鍵詞：EGCG