加味三棱丸抗炎鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)理研究.pdf

1、子宮內(nèi)膜異位癥是一種炎癥性疾病、疼痛性疾病，三棱丸是否具有抗炎鎮(zhèn)痛作用還不得而知。本試驗對三棱丸鎮(zhèn)痛和抗炎作用進(jìn)行研究，為將來將其開發(fā)成為治療子宮內(nèi)膜異位癥的新藥提供實驗基礎(chǔ)。 目的： 觀察三棱丸(SLW)對疼痛和炎癥動物模型的鎮(zhèn)痛和抗炎作用，以及對炎癥滲出液中前列腺素E2(PGE2)、組胺(Hist)和5-羥色胺(5-HT)含量的影響，為該制劑提供臨床前研究藥效學(xué)研究資料。 方法： 1.鎮(zhèn)痛作用試驗1.

2、1熱板法篩選痛覺反應(yīng)潛伏期在10～30秒的昆明種雌性小鼠，隨機(jī)分為5組，分別灌胃給予三棱丸1.43mg·kg-1·d-1、0.48mg·kg-1·d-1、0.16mg·kg-1·d-1，曲馬多20mg·kg-1·d-1，模型組灌胃給予生理鹽水0.2 mL·10g-1·d-1，30min后，將小鼠放在55±0.5℃熱板上。 測定各組小鼠痛覺反應(yīng)潛伏期。 1.2扭體法選擇昆明種小鼠，隨機(jī)分為5組，分別灌胃給予三棱丸1.43mg·kg

3、-1·d-1、0.48mg·kg-1·d-1、0.16mg-kg-1·d-1，塞來昔布25mg.kg-1·d-1，模型組灌胃給予生理鹽水0.2 mL·10 g-1·d-1，每天灌胃給藥一次，連續(xù)給藥3d，末次給藥后30min每只小鼠均腹腔注射新鮮配制的0.7％冰醋酸溶液0.1 mL·10g-1。測定各組小鼠20 min內(nèi)扭體反應(yīng)次數(shù)。 2.抗炎作用試驗2.1 醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加實驗選擇昆明種小鼠，將動物分為6組，分

4、別灌胃給予三棱丸 1.43mg·kg·-1·d-1、0.48mg·kg-1·d-1、0.16mg·kg-1.d-1，塞來昔布 25mg·kg-1·d-1，模型組和正常組分別灌服生理鹽水0.2 mL.10 g-1·d-1，每天灌胃給藥一次，連續(xù)給藥3d，末次給藥后30min尾靜脈注射0.5％伊文斯藍(lán)溶液0.1 mL·10g-1，并立即腹腔注射配制的0.7％醋酸溶液0.1 mL·10 g-1(正常組小鼠不腹腔注射醋酸溶液)，建立毛細(xì)血管通透

5、性增加小鼠模型。測定各組小鼠腹腔內(nèi)伊文斯藍(lán)溶液濃度。 2.2耳腫脹法選擇昆明種小鼠，隨機(jī)分為5組，分別灌胃給予三棱丸1.43mg·kg-1·d-1、0.48mg·kg-1·d-1、0.16mg·kg-1·d-1，塞來昔布 25mg·kg-1·d-1，模型組灌胃給予生理鹽水0.2 mL·10g-1·d-1，每天灌胃給藥一次，連續(xù)給藥3d，末次給藥后30min每只小鼠均右耳廓均勻涂抹100％二甲苯0.03 mL/只致炎，建立炎癥小鼠

6、模型。測定各組小鼠耳腫脹度。 2.3大鼠足爪腫脹法選擇Wistar雄性大鼠，隨機(jī)分為5組，分別灌胃給予三棱丸1.02mg·kg-1·d-1、0.34mg·kg-1·d-1、0.11mg·kg-1·d-1，塞來昔布20mg·kg-1·d-1，模型組灌服生理鹽水0.1 mL·10 g-1·d-1，每天灌胃給藥一次，連續(xù)給藥3d，末次給藥后立即每只大鼠均右后足跖部皮下注射1％角叉菜膠0.1札/只致炎，建立炎癥大鼠模型。測定各組大鼠足跖

7、腫脹率。 2.4棉球誘導(dǎo)大鼠肉芽組織增生實驗選擇 Wistar雄性大鼠，將棉球(每個重30 mg±0.5 mg)分別植入大鼠兩側(cè)腹股溝皮下，建立慢性炎癥大鼠模型。將造模成功大鼠分為5組，于造模成功第0d開始分別灌胃給予三棱丸1.02mg·kg-1·d-1、0.34mg·kg-1·d-1、0.11mg·kg-1·d-1，塞來昔布20mg·kg-1·d-1，模型組灌服生理鹽水0.1 mL·10 g-1·d-1，每天灌胃給藥一次，連續(xù)

8、給藥7d，第8d取出棉球，測定各組大鼠肉芽腫凈重。 結(jié)果： 1.鎮(zhèn)痛作用試驗1.1熱板法 SLW 1.43 mg·kg-1·d-1 組的痛覺反應(yīng)潛伏期較用藥前明顯延長，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.01)：SLW 0.48mg·kg-1·d-1、0.16 mg·kg-1·d-1 組的痛覺反應(yīng)潛伏期較用藥前有延長，但與模型組比較，差異無顯著性(P＞0.05)。提示SLW 1.43mg·kg-1·d-1組具有一定的鎮(zhèn)痛

9、作用。 1.2扭體法 SLW 1.43 mg·kg-1·d-1 組的扭體反應(yīng)潛伏期與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.01)；SLW 1.43 mg·kg-1·d-1 組與0.48mg·kg-1·d-1組的動物在20min內(nèi)的扭體次數(shù)明顯減少，與模型組比較，差異有顯著性(p＜0.01)，提示SLW有抗小鼠扭體反應(yīng)的作用。 2.抗炎作用試驗2.1 醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加實驗?zāi)Ｐ徒M伊文斯藍(lán)滲出量與正常組比較，差異有顯著性(

10、P＜0.01)。SLW 0.16 mg·kg-1·d-1組對醋酸引起的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加具有明顯抑制作用，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.05)；SLW 1.43 mg·kg-1·d-1、0.48mg·kg-1·d-1 組對醋酸引起的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加具有明顯抑制作用，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。提示SLW有抑制醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的作用。 2.2耳腫脹法 SLW 0.48 mg·

11、kg-1·d-1 組可使鼠耳腫脹度顯著降低，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。提示SLW 0.48mg·kg-1·d-1組有抗小鼠耳腫脹的作用。 2.3大鼠足爪腫脹法 SLW 0.11 mg·kg-1·d-1 組在致炎后3、4h時可使大鼠足爪腫脹度顯著降低，與模型組比較，差異有顯著性(致炎后 3h 時P＜0.01，4h 時P＜0.05)；SLW 1.02 mg·kg-1·d-1 組在致炎后2、3、4h時可使大鼠足爪腫脹

12、度顯著降低，與模型組比較，差異有顯著性(致炎后2、3h時P＜0.01，4h時P＜0.05)；SLW 0.34 mg·kg-1·d-1組在致炎后1、2、3、4h時均可使大鼠足爪腫脹度顯著降低，與模型組比較，差異均有顯著性(致炎后2、3h時P＜0.01，1、4h時P＜0.05)。提示 SLW 0.34 mg·kg-1·d-1 組有較好的抗大鼠足爪腫脹的作用。 2.4棉球誘導(dǎo)大鼠肉芽組織增生實驗 SLW 0.34 mg·kg-1·d-1、0.

13、11 mg·kg-1·d-1 組可明顯抑制棉球誘導(dǎo)大鼠肉芽組織增生，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.05)；SLW 1.02 mg·kg-1·d-1 組可明顯抑制棉球誘導(dǎo)大鼠肉芽組織增生，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。提示SLW能有效抑制棉球誘導(dǎo)大鼠肉芽組織增生。 3.抗炎機(jī)理試驗3.1 大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中 PGE2 含量實驗?zāi)Ｐ徒M炎癥滲出液中 PGE2 含量與正常組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。

14、SLW1.02mg·kg-1·d-1 組和0.11 mg·kg-1·d-1組可明顯抑制大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中PGE2含量增高，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.05)；SLW 0.34 mg·kg-1·d-1組可明顯抑制大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中PGE2含量增高，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。提示SLW0.34 mg·kg-1·d-1 組有較好的減少大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中PGE2含量的作用。 3.2大鼠角

15、叉菜膠性炎癥滲出液中Hist含量實驗?zāi)Ｐ徒M炎癥滲出液中Hist含量與正常組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。SLW 1.02mg·kg-1·d-1、0.34 mg·kg-1·d-1、0.11 mg·kg-1·d-1組均可明顯抑制大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中Hist含量增高，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.05)。提示SLW 1.02 mg·kg-1·d-1、0.34 mg·kg-1·d-1、0.11mg·kg-1·d-1組有較好的減

16、少大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中Hist含量的作用。 3.3大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中5-HT 含量實驗?zāi)Ｐ徒M炎癥滲出液中5-HT含量與正常組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。SLW 1.02mg·kg-1·d-1、0.34 mg·kg-1·d-1組可明顯抑制大鼠角叉菜膠性炎癥滲出液中5-HT含量增高，與模型組比較，差異有顯著性(P＜0.01)。提示SLW 1.02 mg·kg-1·d-1、0.34 mg·kg-1·d-1 組有較好的減少