亮氨酸對燒傷后兔肌肉蛋白代謝的作用.pdf

1、第一部分 <'13>C-亮氨酸示蹤法測定兔燒傷后整體蛋白代謝改變研究 目的：通過沸水燙傷建立實(shí)驗(yàn)兔高分解代謝模型，利用<'13>C-亮氨酸作為示蹤劑，測定兔燒傷后整體水平的蛋白質(zhì)代謝改變，觀察其具體的代謝途徑。 材料與方法：健康新西蘭白兔20只(2.2-2.6kg，雌雄不拘)，隨機(jī)分為兩組，即燒傷組和對照組。適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，燒傷組建立15％總體表面積的Ⅲ度燒傷模型，對照組僅給予麻藥和抗生素。繼續(xù)喂養(yǎng)7天后行頸動(dòng)靜脈插管

2、及氣管切開插管，然后經(jīng)頸靜脈給予NaH<'13>CO<,3>“首劑量10 μmol.kg<'-1>+維持量10 μmol．kg<'-1>.h<'-1>”2小時(shí)，再改為<'13>C-亮氨酸“首劑量4.2 μmol.kg<'-1>+維持量4.2 μmol．kg<'-1>．h<'-1>”3小時(shí)，采集不同時(shí)間點(diǎn)的頸動(dòng)脈血樣及呼氣樣本，分別利用GC—MS儀和IRIS儀測定血中a-酮異己酸和呼氣中二氧化碳的<'13>C豐度，最后根據(jù)公式計(jì)算出蛋白質(zhì)

3、的分解率、合成率及氮平衡情況。 結(jié)果：燒傷一周后，燒傷組體重明顯下降(-11.0％)，而同期對照組體重表現(xiàn)為增加(+5.2％)，兩組間體重變化有顯著差異(P<0.01)。與對照組相比，燒傷組的亮氨酸總更新率和氧化率明顯升高，分別增加了92.3％和175％，說明機(jī)體整體蛋白分解率增加、負(fù)氮平衡加劇(P<0.01)。而與對照組相比，燒傷后的整體蛋白合成率雖有增加趨勢(4.13±1.50 g.kg<'-1>.d<'-1> vs 2.6

4、9±0.88 g．kg<'-1>．d<'-1>)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.15)。 結(jié)論：1．成功建立兔高分解代謝模型，燒傷后整體蛋白分解加劇、負(fù)氮平衡顯著：2．<'13>C-亮氨酸示蹤法測定整體蛋白質(zhì)代謝水平行之有效。 第二部分亮氨酸對燒傷后兔肌肉蛋白質(zhì)代謝的作用研究 目的：以<'13>C-苯丙氨酸為示蹤劑，觀察不同亮氨酸濃度的腸外營養(yǎng)液對家兔燒傷后肌肉蛋白質(zhì)代謝的作用，并進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。 材料與

5、方法：健康新西蘭白兔40只(2.2-2.6kg，雌雄不拘)，同第一部分建立燒傷模型并繼續(xù)喂養(yǎng)，在燒傷后第7天行頸動(dòng)靜脈插管、左側(cè)腎動(dòng)靜脈插管和左腎切除術(shù)。術(shù)后隨機(jī)分為四組，經(jīng)頸靜脈給予不同的營養(yǎng)支持，分別為普通糖水組(G1u組)、標(biāo)準(zhǔn)腸外營養(yǎng)組(SPN組)、支鏈氨基酸腸外營養(yǎng)組(BCAA組)、和高亮氨酸腸外營養(yǎng)組(Leu組)，三組腸外營養(yǎng)液等氮等熱卡配置，輸注量為非蛋白熱卡6.25 kcal/h，氮量52.5mg／h，四組之間總的熱卡供

6、應(yīng)相等，為7.63kcal/h。營養(yǎng)支持1小時(shí)后經(jīng)頸靜脈同時(shí)給予<'13>C-苯丙氨酸“首劑量1l μmol．kg<'-1>+維持量11 μmol．kg<'-1>．h<'-1>”6小時(shí)，另經(jīng)腎動(dòng)脈持續(xù)給予3％對氨基馬尿酸鈉作為血流示蹤劑，速度為4.8ml/h。成對采集不同時(shí)間點(diǎn)的頸動(dòng)脈和腎靜脈血樣，分別利用GC-MS儀和分光光度計(jì)測定其中的苯丙氨酸濃度、豐度和對氨基馬尿酸鈉的濃度，最后根據(jù)公式計(jì)算出雙下肢肌肉蛋白的代謝參數(shù)。 結(jié)