抗鰻利斯頓氏菌雞卵黃抗體對(duì)致病香魚(yú)保護(hù)作用的研究.pdf

1、特異性卵黃抗體( S p e c i f i c eggyolk immunoglobulin Y，IgY)是通過(guò)特定抗原免疫產(chǎn)蛋雞，從免疫母雞產(chǎn)的雞蛋蛋黃中提取出來(lái)的，可用于感染特定病原疾病的預(yù)防和治療?？诜u卵黃抗體作為預(yù)防和治療微生物感染引起的動(dòng)物疾病，效果明顯，受到廣泛關(guān)注。本研究利用硫酸銨鹽析法提取抗鰻利斯頓氏菌卵黃抗體，并通過(guò)膜透析法進(jìn)行分離純化。購(gòu)買(mǎi)的健康香魚(yú)分為3組，腹腔注射鰻利斯頓氏菌后，分別灌胃特異性抗鰻利斯頓氏菌卵

2、黃抗體( Anti-L.anguillarum IgY aLIgY)、非特異性卵黃抗體( nonspecific IgY nspIgY)和等量的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，灌胃100mg/kg和200mg/kg(灌胃卵黃抗體量/香魚(yú)體重)特異性卵黃抗體組香魚(yú)的累計(jì)存活率分別為50％和80%均高于非特異性卵黃抗體組，香魚(yú)存活率分別為10%和15%，生理鹽水對(duì)照組的香魚(yú)7天后全部死亡；分別于香魚(yú)感染鰻利斯頓氏菌不同時(shí)間點(diǎn)灌胃200mg/kg特異

3、性卵黃抗體，結(jié)果表明感染后即刻灌胃特異性卵黃抗體香魚(yú)存活率最高為80%，在感染7天前和感染1天后灌胃保護(hù)效果次之，累計(jì)存活率分別為64%和55%。揭示特異性卵黃抗體對(duì)感染鰻利斯頓氏菌的香魚(yú)具有積極的保護(hù)作用，且灌胃時(shí)間是特異性卵黃抗體發(fā)揮保護(hù)作用的一個(gè)關(guān)鍵的影響因素。平板計(jì)數(shù)法比較感染香魚(yú)即刻灌胃特異性卵黃抗體和非特異性卵黃抗體12h后香魚(yú)的血液、肝、脾和頭腎組織中的載菌量，結(jié)果表明特異性卵黃抗體組香魚(yú)的血、肝、脾和頭腎中的載菌量顯著低

4、于灌胃非特異性卵黃抗體組，說(shuō)明特異性卵黃抗體可能通過(guò)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)發(fā)揮保護(hù)香魚(yú)的作用。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR測(cè)定香魚(yú)感染后即刻灌胃兩種卵黃抗體，24h后各組香魚(yú)的肝、脾、頭腎組織中腫瘤壞死因子( T N F-α)，白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)，白細(xì)胞源趨化因子2(LECT2)的mRNA的表達(dá)變化，結(jié)果表明灌胃特異性卵黃抗體組除了肝組織中的LECT2，其余各組織各炎癥因子的表達(dá)量均顯著低于非特異卵黃抗體組和感染對(duì)

5、照組。表明特異性卵黃抗體可能通過(guò)抑制炎癥因子的表達(dá)抑制炎癥反應(yīng)。頭腎巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)表明，特異性卵黃抗體處理的巨噬細(xì)胞對(duì)鰻利斯頓氏菌的吞噬率明顯高于非特異卵黃抗體處理組，說(shuō)明抗鰻利斯頓氏菌卵黃抗體可以通過(guò)增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬鰻利斯頓氏菌的活力提高染病香魚(yú)的抵抗力。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果揭示通過(guò)灌胃特異性卵黃抗體對(duì)感染鰻利斯頓氏菌的香魚(yú)能夠發(fā)揮有效的治療和預(yù)防作用，且保護(hù)作用機(jī)制可能和特異性卵黃抗體的抑菌殺菌作用、增強(qiáng)吞噬細(xì)胞吞噬活性以及調(diào)節(jié)炎癥因子的