豬源乳酸菌的篩選及對仔豬免疫應答的影響和臨床效果的研究.pdf

1、為開發(fā)出適合于仔豬的高活性乳酸菌制劑，本研究從四川多個規(guī)模化豬場10日齡左右的健康仔豬糞便中分離出乳酸乳桿菌(RS-4)，乳酸乳桿菌(RS-6)，乳鏈球菌(RS-7)，懶惰乳桿菌(RS-9)，嗜酸乳桿菌(RS-19)和嗜酸乳桿菌(RS-22)。 通過低酸性環(huán)境、高膽鹽濃度和高蛋白酶條件下的生長存活試驗，最終篩選出能在pH2.5酸性環(huán)境、0.3％膽鹽和1％消化酶中能存活生長的RS-4、RS-6、RS-19和RS-22菌株作為后續(xù)研

2、究用菌株。 產(chǎn)酸試驗顯示，菌株RS-4、RS-6、RS-19和RS-22培養(yǎng)液pH值由培養(yǎng)初始時的6.0，分別下降至pH相對穩(wěn)定時的4.0、4.3、3.84和4.0，表明上述菌株是產(chǎn)酸較強的菌株。 4株菌的代謝產(chǎn)物對指示菌均有明顯的抑制作用，各菌株對金黃色葡萄球菌的抑制作用最強，抑菌圈直徑在18.34-22.63mm之間；對大腸桿菌的抑菌圈在15.76-18.53mm；對沙門氏菌的抑制作用相對較弱，在14.20-16.5

3、3mm間。菌株RS-19的代謝產(chǎn)物體外抑制大腸桿菌、沙門氏菌和金黃色葡萄球菌的效果均顯著高于菌株RS-4、RS-6和RS-22(p<0.01)。細菌培養(yǎng)液pH值越低，細菌代謝產(chǎn)物抑菌活性越強。1％蛋白酶對各菌株代謝產(chǎn)物活性幾乎沒有影響。 經(jīng)小白鼠灌服O.5ml各菌株的22h培養(yǎng)液(cfu為10<'9>.ml<'-1>)，無一只小鼠出現(xiàn)死亡和發(fā)生疾病。各菌株具有可靠的安全性。 用活菌數(shù)10<'8>cfu/ml的4株菌組合制

4、劑灌服新生仔豬，每天1ml/頭，連續(xù)7天，外周血液T淋巴細胞形成玫瑰花環(huán)的比率和T淋巴細胞增殖反應在10-30d顯著高于對照組仔豬(P<0.05或P<0.01)。 給初生仔豬灌服4株菌組合制劑，在30天內(nèi)試驗組仔豬成活率為100％，對照組仔豬因腹瀉有2頭發(fā)生死亡，成活率為90％；試驗組仔豬腹瀉率僅3.5％，對照組仔豬腹瀉率為13.6％。試驗組平均日增重顯著大于對照組平均日增重(p<0.05或p<0.01)，平均日增重提高了18.