活血、行氣和補氣三治法不同配伍比例對心梗后心血瘀證大鼠心功能和心肌細胞凋亡的影響.pdf

1、[目的]
　　 分析活血、行氣、補氣三因素不同配伍比例對心梗后心血瘀證大鼠心功能和心肌細胞凋亡的影響，探討治療心血瘀證大鼠的最佳治療方案，為臨床醫(yī)生科學(xué)組方用藥提供客觀依據(jù)，以提高中醫(yī)藥對心梗后心血瘀證的臨床療效。
　　 [方法]
　　 采用結(jié)扎左冠狀動脈前降支復(fù)制大鼠心梗心血瘀證模型，參照正交設(shè)計表四因素（活血法、行氣法、補氣法、空白對照）三水平（全劑量、1/2劑量、0劑量）分為9組，給以大鼠中藥治療，并設(shè)定模

2、型組和假手術(shù)組。觀察一般情況至灌胃治療2周后，行血流動力學(xué)檢測評價大鼠心功能，取心肌組織HE染色光鏡觀察心肌組織的形態(tài)學(xué)變化、電鏡觀察大鼠心肌細胞超微結(jié)構(gòu)的變化、TUNEL檢測心肌細胞的凋亡指數(shù)，免疫組化檢測Caspase-3蛋白的表達情況。
　　 [結(jié)果]
　　 1.一般情況:①術(shù)后1～7天，治療組和模型組大鼠均表現(xiàn)為拱背站立的強迫體位，呼吸急促，毛蓬松豎立，對外界刺激敏感，易激惹等心血瘀阻實證表現(xiàn)，并且活動量減小，飲

3、食下降，爪背和指甲的顏色呈暗紅色、輕度水腫，與假手術(shù)組相比差別明顯;②術(shù)后8-14天，模型組大鼠漸出現(xiàn)精神萎靡，蜷縮，毛色漸黃，對外界反應(yīng)稍遲鈍等心氣虛病證，治療組大鼠與其相比癥狀較其減輕，與假手術(shù)組相比還有一定的差別，但各治療組間癥狀差別不明顯;③除假手術(shù)組外，其余各組大鼠臨處死前體重較造模后體重均有所下降。
　　 2.血流動力學(xué)指標測定:①與假手術(shù)組比較:模型組大鼠LVSP、±dp/dtmax顯著低于假手術(shù)組大鼠，具有統(tǒng)計學(xué)

4、意義(P＜0.05或0.01)，LVEDP高于假手術(shù)組，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);②與模型組比較:治療組1、2、4和6組大鼠LVSP顯著高于模型組大鼠，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，LVEDP顯著低于模型組大鼠，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05或0.01)，其余各組與模型組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);治療組1、2組±dp/dtmax顯著高于模型組大鼠，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，其余各組與模型組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.0

5、5)。
　　 3.心肌組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)觀察:
　　 HE染色光鏡下觀察:①假手術(shù)組大鼠心肌排列整齊，細胞核清晰;②模型組大鼠心肌缺血區(qū)心肌細胞腫脹，部分細胞核溶解，炎癥細胞浸潤，心室前壁梗死明確，心肌變薄，梗死心肌纖維化;③與模型組相比，治療組大鼠炎性細胞浸潤減少，缺血區(qū)心肌細胞腫脹減輕，部分細胞核溶解，心肌細胞壞死減少，而且治療組大鼠與模型組比較可見大量血管新生。
　　 透射電鏡觀察:①假手術(shù)組的超微結(jié)構(gòu)未

6、見明顯改變;②模型組大鼠可見細胞存在著大量凋亡，但未見明顯的凋亡小體;③與模型組相比，治療組大鼠心肌肌節(jié)結(jié)構(gòu)較清晰，肌絲斷裂減少，亦可見核膜皺縮，染色質(zhì)凝集，胞漿空泡化等凋亡表現(xiàn)，但凋亡的心肌細胞數(shù)量較模型組減少。
　　 4.TUNEL檢測心肌細胞凋亡指數(shù):①與假手術(shù)組比較:模型組大鼠心肌細胞凋亡指數(shù)顯著高于假手術(shù)組大鼠，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);②與模型組比較:在非梗死區(qū)各治療組大鼠心肌細胞凋亡指數(shù)顯著低于模型組大鼠，具

7、有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05或0.01)，在梗死交界區(qū)治療組1、2、3、4、5、6、8組大鼠心肌細胞凋亡指數(shù)顯著低于模型組大鼠，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 5.免疫組化檢測心肌細胞Caspase-3蛋白的表達情況:①與假手術(shù)組比較:模型組大鼠心肌Caspase-3的表達顯著高于假手術(shù)組大鼠，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）;②與模型組比較:各治療組大鼠在非梗死區(qū)和梗死交界區(qū)心肌Caspase-3的表達顯著低于模型組大鼠，

8、具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 6.采用全劑量活血法、全劑量補氣法、全劑量或半劑量行氣法，對改善心功能療效最好，且各因素對療效的影響從大到小排列為活血法/補氣法＞行氣法。
　　 7.采用全劑量活血法、半劑量行氣法、全劑量補氣法，對抑制心肌細胞凋亡療效最好，且各因素對療效的影響從大到小排列為活血法＞補氣法＞行氣法。
　　 [結(jié)論]
　　 1.活血、行氣、補氣三治法治療心梗后心血瘀證大鼠療效肯定，它能

9、減輕心肌細胞腫脹，抑制其凋亡，改善心功能，對心梗后心肌細胞具有一定的保護作用。
　　 2.活血法、行氣法和補氣法三因素對治療心血瘀證大鼠療效的影響不同，影響心功能的因素從大到小排列為活血法/補氣法＞行氣法，影響心肌細胞凋亡的因素從大到小排列為活血法＞補氣法＞行氣法。
　　 3.通過正交試驗設(shè)計方法，得出改善心功能的最佳方案為:全劑量活血法、全劑量補氣法+全劑量或半劑量行氣法;抑制心肌細胞凋亡的最佳方案為:全劑量活血法、半