重組hIGF-Ⅰ延緩心梗大鼠心肌細(xì)胞老化、改善心功能的研究.pdf

1、目的：應(yīng)用重組治療性類人胰島素樣生長因子Ⅰ（hIGF-Ⅰ）注射于心梗大鼠皮下，檢測反映心肌細(xì)胞增殖的相關(guān)指標(biāo)，探討相互間關(guān)系，為組織工程基因治療心力衰竭奠定基礎(chǔ)。 方法：成功構(gòu)建急性心梗模型1d后，隨機(jī)分實(shí)驗(yàn)組和對照組（n＝18），設(shè)假手術(shù)組12只，實(shí)驗(yàn)組每天60ug/kg.d－1皮下注射重組治療性hIGF-Ⅰ，對照組和假手術(shù)組注射生理鹽水，分別于術(shù)后1、2、4周處死動(dòng)物，留取標(biāo)本。RT-PCR檢測心肌組織rIGF-ⅠmRNA及

2、TERTmRNA表達(dá)，ELISA試劑盒檢測血漿、心肌組織中rIGF-1和 hIGF-1濃度。免疫組化檢測心肌細(xì)胞細(xì)胞周期素依賴性激酶4抑制蛋白（p16INK4a）、抑癌基因p53、細(xì)胞核增殖抗原（PCNA）及pKi67蛋白表達(dá)。 結(jié)果： ①實(shí)驗(yàn)組和對照組血漿rIGF-1濃度較同期假手術(shù)組均顯著降低（p<0.01），對照組降低更顯著；實(shí)驗(yàn)組和對照組心肌組織rIGF-1含量較同期假手術(shù)組均顯著增高（p<0.01），第2周達(dá)峰

3、值，實(shí)驗(yàn)組增高更顯著。 ②重組治療性hIGF-Ⅰ治療1周后，實(shí)驗(yàn)組心肌組織均能檢測到hIGF-1，假手術(shù)組及對照組未檢測到，兩者有顯著差異（p<0.01）。 ③心梗后第1周實(shí)驗(yàn)組和對照組心肌組織rIGF-1mRNA表達(dá)較假手術(shù)組明顯增高（p<0.01），第2周達(dá)峰值，實(shí)驗(yàn)組增高更顯著；第4周對照組與假手術(shù)組無顯著差異（p>0.05），但實(shí)驗(yàn)組較假手術(shù)組仍有顯著差異（p<0.01）。 ④實(shí)驗(yàn)組和對照組端粒酶催化亞基

4、基因（TERTmRNA）表達(dá)呈逐漸升高趨勢，和假手術(shù)組比較有顯著差異（p<0.01），實(shí)驗(yàn)組增高更顯著。 ⑤實(shí)驗(yàn)組和對照組p16INK4a表達(dá)在第1周達(dá)峰值，較假手術(shù)組有顯著差異（p<0.01），以對照組更顯著；自第2周始實(shí)驗(yàn)組與假手術(shù)組無顯著差異（p>0.05）；但對照組在第4周較假手術(shù)組仍有顯著差異（p<0.01）。 ⑥實(shí)驗(yàn)組和對照組PCNA表達(dá)逐步增高，較假手術(shù)組有顯著差異（p<0.01），以實(shí)驗(yàn)組更顯著。

5、 ⑦實(shí)驗(yàn)組和對照組pki67表達(dá)逐步增高，較假手術(shù)組有顯著差異（p<0.01），以實(shí)驗(yàn)組更顯著。 ⑧實(shí)驗(yàn)組和對照組p53在第1周升高達(dá)峰值，然后迅速下降，第4周仍高于假手術(shù)組，較假手術(shù)組均有顯著差異（p<0.01），以對照組增高更明顯。 ⑨假手術(shù)組術(shù)后上述各項(xiàng)指標(biāo)組內(nèi)比較均無差異（p>0.05）。 結(jié)論：重組治療性hIGF-Ⅰ促進(jìn)全身其他組織rIGF-Ⅰ分泌同時(shí)，還能在心肌組織局部聚集，在心梗早期明顯抑制心肌細(xì)胞