人子宮內(nèi)膜干細胞通過分泌外泌體中的microRNA-21保護心肌并改善大鼠心梗后心功能.pdf

1、目的:心肌梗死導(dǎo)致的心肌細胞不可逆的損傷和喪失，是全世界引起充血性心力衰竭導(dǎo)致患者死亡的最重要原因，間充質(zhì)干細胞移植可以促進心肌再生，心功能恢復(fù)，是極具前途的再生療法，大量的臨床實驗結(jié)果已經(jīng)證實了間充質(zhì)干細胞移植治療心肌梗死的有效性和安全性。子宮內(nèi)膜來源的間充質(zhì)干細胞具有間充質(zhì)干細胞的特性，具有極低的免疫原性，可通過女性月經(jīng)血中分離獲取。近年來，我們團隊報道了子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞對于心肌梗死的顯著療效，并且發(fā)現(xiàn)其分泌更多的心臟保護相關(guān)的

2、細胞因子和生長因子。為了進一步探索子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞療效的內(nèi)在分子機制，我們在心梗大鼠心肌內(nèi)注射子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞，骨髓間充質(zhì)干細胞和脂肪間充質(zhì)干細胞，并對其旁分泌的治療效果進行比較，做更深入的研究。
　　方法和結(jié)果:在實驗的在體部分，我們在構(gòu)建大鼠心肌梗死模型之后將三種間充質(zhì)干細胞分別進心肌注射進入不同大鼠心臟梗死周邊區(qū)，對照組注射同等體積的PBS。在術(shù)后28以及56天我們發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞較其他兩種間充質(zhì)干細胞能顯著

3、改善心梗大鼠的心功能，促進血管再生，減少心肌細胞凋亡，從而使其心梗面積較其他組顯著減少。在實驗的離體部分，我們先運用流式細胞技術(shù)檢測子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞，骨髓間充質(zhì)干細胞和脂肪間充質(zhì)干細胞的表面標記。然后我們將三種間充質(zhì)干細胞的條件上清分別和乳鼠心肌細胞以及人類臍靜脈內(nèi)皮細胞進行共培養(yǎng)，然后分別檢測心肌細胞在缺氧條件下的凋亡率和人類臍靜脈細胞管腔形成的能力。經(jīng)過檢測后我們發(fā)現(xiàn)與其他組織來源的間充質(zhì)干細胞相比，子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞來源的條

4、件上清能顯著減低缺氧對于乳鼠心肌細胞的損傷，并且能大幅度提高人類臍靜脈內(nèi)皮細胞管腔形成的能力。然后我們進一步從三種間充質(zhì)干細胞的條件上清提取外泌體，用microRNA芯片進行篩選后發(fā)現(xiàn)在子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞分泌的外泌體中microRNA-21表達最高，我們進而在心肌細胞和人類臍靜脈細胞中驗證microRNA-21靶基因PTEN，發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞的外泌體作用后靶細胞中的PTEN表達相應(yīng)下調(diào)，并且激活了下游信號通路，從而發(fā)揮了抗凋亡