中鏈三酰甘油對(duì)腦力疲勞大鼠抗氧化和認(rèn)知能力的影響.pdf

1、一、研究背景
　　 人體的活動(dòng)大體上分為體力和腦力勞動(dòng)2種，都是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（由腦和脊髓組成）的統(tǒng)一協(xié)調(diào)下完成的?，F(xiàn)代社會(huì)中，雖然大多數(shù)人的體力勞動(dòng)強(qiáng)度有所減輕，但腦力勞動(dòng)強(qiáng)度卻明顯加重，再加上生活節(jié)奏加快和社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)等壓力的增大，最終導(dǎo)致腦力疲勞的人群不斷擴(kuò)大，腦力疲勞程度也不斷加重。
　　 因此，腦力疲勞以及由此發(fā)展而來(lái)的慢性疲勞綜合征，已經(jīng)嚴(yán)重威脅著普通人群的身心健康。同時(shí)，新形勢(shì)下武警部隊(duì)執(zhí)勤、處突、反恐任務(wù)增強(qiáng)

2、，部隊(duì)訓(xùn)練任務(wù)日趨繁重，訓(xùn)練項(xiàng)目增多，強(qiáng)度也不斷加大，由軍事訓(xùn)練引發(fā)的運(yùn)動(dòng)性疲勞和精神性疲勞在基層部隊(duì)時(shí)常可見(jiàn)。因此，研究腦力疲勞發(fā)生機(jī)制及其預(yù)防策略具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)疲勞的研究主要在對(duì)天然動(dòng)植物、天然動(dòng)植物提取物，還有氨基酸、維生素、輔酶Q咖啡因等，僅有數(shù)篇關(guān)于對(duì)中鏈脂肪酸能提高運(yùn)動(dòng)能力的報(bào)道。
　　 中鏈脂肪酸(MCFA)是由6～12個(gè)碳原子構(gòu)成的，是自然界中含量比較少的脂肪酸，來(lái)源于棕櫚油、椰子油、乳類(lèi)及其制

3、品等，主要有辛酸(C8H16O2)和癸酸(C10H20O2)。MCFA在食物中以三酰甘油的形式存在，即中鏈三酰甘油(MCT)。中鏈三酰甘油消化吸收及利用途徑特殊，能夠被機(jī)體迅速的吸收利用，快速提供能量。查閱文獻(xiàn)可知，中鏈三酰甘油能夠降低血清三酰甘油和低密度脂蛋白;改善糖尿病人的胰島素抵抗;減少體脂肪積累，預(yù)防肥胖;提高免疫功能，防止細(xì)菌感染等。也有人體實(shí)驗(yàn)證明，運(yùn)動(dòng)員食用中鏈脂肪酸，可以提高其運(yùn)動(dòng)能力。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

4、方法，通過(guò)在對(duì)大鼠飼料中添加中鏈三酰甘油并對(duì)大鼠進(jìn)行睡眠剝奪來(lái)造成腦力疲勞模型，觀察研究中鏈三酰甘油對(duì)大鼠各項(xiàng)血脂生理指標(biāo)、抗氧化能力和學(xué)習(xí)認(rèn)知能力的影響，并推測(cè)其作用機(jī)制，為中鏈三酰甘油是否具有緩解或加重腦力疲勞作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論支持。
　　 二、研究?jī)?nèi)容
　　 （一）目的
　　 1、觀察評(píng)價(jià)中鏈三酰甘油對(duì)腦力疲勞是否具有緩解或加重作用;
　　 2、推測(cè)中鏈三酰甘油對(duì)腦力疲勞作用的機(jī)制;
　　

5、 3、為中鏈三酰甘油與腦力疲勞間關(guān)系提供科學(xué)依據(jù)。
　　 （二）方法
　　 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組
　　 健康雄性Sprague-Dawley大鼠35只，體重(150～160)g，由第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)買(mǎi)。在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，先行適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。1w后，將35只大鼠進(jìn)行迷宮測(cè)試，淘汰遲鈍者，留下30只，隨機(jī)分成5組，每組6只。分組情況如下:空白正常睡眠組(NC組)、空白睡眠剝奪組（SD組）、低劑量MCT組(LD組)

6、、中劑量MCT組(MD組)和高劑量MCT組(HD組)。
　　 2、實(shí)驗(yàn)方法
　　 用MCT粉劑訂制特定的飼料，用含低、中、高劑量MCT的飼料分別喂養(yǎng)LD組、MD組和HD組的大鼠，NC組和SD組大鼠則用不含MCT的原配方飼料喂養(yǎng)。每只大鼠每天限定飼料15g，飲水不限量。持續(xù)喂養(yǎng)4w，每天觀察飼料食用情況，每周稱量大鼠體重。每周對(duì)各組大鼠進(jìn)行3次Y電迷宮訓(xùn)練，每只每次訓(xùn)練20次。4w后，大鼠禁食12h，麻醉并眼眶取血，血清在

7、4℃3000r/min離心20min。正常飼養(yǎng)3天后，對(duì)大鼠進(jìn)行連續(xù)72h睡眠剝奪。睡眠剝奪后，進(jìn)行電迷宮測(cè)試，觀察各組大鼠的記憶認(rèn)知能力;迷宮測(cè)試后，立即將大鼠麻醉，采集組織樣本。
　　 3、樣本采集
　　 迷宮測(cè)試后，立即將大鼠麻醉，迅速斷頭，快速在冰袋上分離腦干、海馬，在冰冷的生理鹽水中沖凈血漬，放入凍存管后投入液氮罐中暫時(shí)保存。取大鼠肝臟組織，同樣沖凈血漬后放入凍存管投入液氮罐中保存。所有組織取完時(shí)，將液氮中凍存

8、管轉(zhuǎn)移至-75℃水箱中保存待測(cè)。
　　 4、指標(biāo)測(cè)定
　　 (1)血生化指標(biāo)檢測(cè)用日立全自動(dòng)生化儀測(cè)定總?cè)８视?totaltriglyceride，TG)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(highdensity lipoprotein cholesferol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low densitylipoprotein cholestorol, LDL-C)含

9、量。
　　 (2)肝臟抗氧化指標(biāo)檢測(cè)按試劑盒操作方法檢測(cè)GSH-Px、SOD活性和MDA含量。
　　 (3)腦干神經(jīng)遞質(zhì)檢測(cè)按3-CAT試劑盒說(shuō)明測(cè)定去甲腎上腺素(norepinephrine,NE)、腎上腺素(adrenalin，AD)和多巴胺(dopamine，DA)的含量;按5-羥色胺試劑盒說(shuō)明檢測(cè)5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)含量。
　　 (4)海馬部分基因表達(dá)采用實(shí)時(shí)熒光

10、定量PCR技術(shù)，檢測(cè)NMDA受體亞單位NR1/NR2A mRNA以及GABA受體GABAARα1 mRNA的表達(dá)水平。
　　 5、數(shù)據(jù)處理
　　 所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示，采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 三、結(jié)果
　　 1、MCT可以延緩大鼠體重增長(zhǎng)(P＜0.05，P＜0.01)，升高HDL/LDL比值(P＜0.05，P＜0.01)，高劑量MCT

11、可以降低大鼠血清TC和LDL-C(P＜0.01)，中劑量和高劑量MCT會(huì)升高大鼠血清TG(P＜0.05)，低劑量MCT升高大鼠血清HDL-C(P＜0.01)。
　　 2、睡眠剝奪后，各劑量MCT組大鼠的迷宮反應(yīng)正確率均比SD組升高(P＜0.05，P＜0.01)。
　　 3、中劑量MCT可以提高肝臟GSH-Px的活力(P＜0.05)，降低MDA水平(P＜0.05)，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。
　　 4、MCT可以增加睡眠

12、剝奪后大鼠腦干中去甲腎上腺素、腎上腺素、多巴胺的濃度(P＜0.05)，降低腦干5-羥色胺水平（P＜0.05）。
　　 5、MCT可以增加睡眠剝奪大鼠海馬內(nèi)NMDA受體亞單位NR1、NR2A的表達(dá)量(P＜0.05)，減少GABAARα1的表達(dá)（P＜0.05）。
　　 四、結(jié)論
　　 1、MCT可以減緩大鼠體重增長(zhǎng)，調(diào)節(jié)大鼠血脂水平。
　　 2、MCT能夠提高睡眠剝奪后大鼠的抗氧化能力，防止氧化損傷。