2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:評價尿液流式細胞分析儀UF-1000i測定尿液細菌數(shù)的準確性;用全自動尿液流式細胞分析儀UF-1000i確立尿液細菌數(shù)的參考區(qū)間,為臨床上尿路感染的診斷、用藥以及療效的觀察等提供幫助。
   方法:(1)用標準菌株ATCC25922(大腸埃希菌)和ATCC25923(金黃色葡萄球菌)制成一定濃度的菌懸液,選擇103~108cfu/ml濃度同時用UF-1000i和細菌培養(yǎng)檢測其中的菌落數(shù),對UF1000i進行線性評價,選擇1

2、03~105cfu/ml的濃度對其進行準確性和精密性評價,選擇105cfu/ml用SPSS16.0進行準確性評價。選擇16SrDNA基因的保守區(qū)作為靶基因確定細菌的通用引物,利用SYBRGreenⅠ熒光染料建立RQ-PCR反應(yīng)體系。采用含靶基因特異性擴增片段的重組質(zhì)粒建立標準曲線,從而對不同濃度的E.col樣品進行細菌定量,并對其準確性進行評價。模擬服用抗生素及含有死菌的標本,分別用UF-1000i、細菌培養(yǎng)法和實時熒光PCR法細菌計數(shù)

3、從分子水平評價UF-1000i;(2)收集263份(133男性,130女性)正常人中段尿,用UF-1000i檢測其細菌數(shù)和電導(dǎo)率,用全自動生化分析儀測定其肌酐濃度。依照CLSI指導(dǎo)文件規(guī)定確立尿液細菌數(shù)參考區(qū)間,并建立用肌酐濃度和電導(dǎo)率校正后的尿液細菌數(shù)參考區(qū)間。收集87份門診病人中段尿,以培養(yǎng)法為“金標準”評價用UF1000i所建立的三個參考區(qū)間。
   結(jié)果:(1)UF-1000i在檢測ATCC25922和ATCC25923

4、時的線性范圍在103~107cfu/ml之間,精密性CV值平均為12.3%,培養(yǎng)法為22.3%。培養(yǎng)法和UF1000i所測定的細菌數(shù)無顯著性差異(p>0.05)。實時熒光定量PCR法,其精密性CV值平均為13.2%。培養(yǎng)法和RQ-PCR所測定的細菌數(shù)無顯著性差異(p>0.05)。模擬服用抗生素和含有死菌的標本,UF1000i、RQ-PCR、培養(yǎng)法測定的準確性分別為110.5%、89.6%、111.3%、76.9%、50.1%和0%。(2

5、)男性的尿液細菌數(shù),肌酐校正后細菌數(shù)及電導(dǎo)率校正后細菌數(shù)的參考區(qū)間上限分別為23.3個/ul,2.0個/mmolCr和1.4個cm/ulms,女性的分別為353.8個/ul,49.5個/mmolCr和28.1個cm/ulms。87份門診病人用培養(yǎng)法和UF1000i測定所得結(jié)果無顯著性差異(P>0.05)。UF1000i細菌計數(shù)參考區(qū)間診斷尿路感染的特異度為87.5%,靈敏度為80%,約登指數(shù)為0.675;電導(dǎo)率校正后的參考區(qū)間特異度為8

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