肝腫瘤細胞內(nèi)Sox17基因mRNA的表達水平與細胞遷移、侵襲力的相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的:HCC是由于遺傳學或者是實驗胚胎學上的異常變化所導致的。隨著腫瘤生物學水平的發(fā)展,很多報道認為后天的沉默導致基因功能的缺失是HCC的主要原因。研究證實SOX17的表達通過啟動序列區(qū)域的超甲基化而下降,在結(jié)腸癌患者內(nèi)普遍發(fā)生SOX17甲基化,進而發(fā)生SOX17基因表達的下調(diào)。WNT信號通路是決定細胞結(jié)局的高度保守的通路。WNT作為胞外信號分子,WNT信號的異常激活將會導致癌癥的發(fā)展。β-catenin是WNT通路的關(guān)鍵影響因子

2、,通過在核內(nèi)聚集及作為TCF/淋巴增強因子調(diào)節(jié)靶基因的激活。SOX17能夠通過與TCF/LEF和β-catenin各自的HMG區(qū)域結(jié)合起作用,通過GSK3β機制來降解β-catenin。有學者實驗證實恢復SOX17的表達,能夠抑制HepG2的克隆形成率,通過資料查新,我們發(fā)現(xiàn)國內(nèi)外近期還沒有關(guān)于SOX17基因的表達水平與肝腫瘤細胞的侵襲能力的研究。CTTN基因編碼皮層肌動蛋白(cortactin),這是一種微絲肌動蛋白結(jié)合蛋白,主要參與

3、細胞骨架系統(tǒng)的調(diào)控,研究表明cortactin與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。目前關(guān)于SOX17基因與肝腫瘤細胞的遷移、侵襲能力之間的關(guān)系尚未體積,本文旨在上探討肝腫瘤細胞內(nèi)Sox17的mRNA表達量與細胞遷移、侵襲力、CTTN表達水平的相關(guān)性。
　　方法:收集四種肝腫瘤細胞HepG2、MHCC_97L、LM3、SK_Hep_1及一種非腫瘤肝上皮細胞QSG7701,通過Real-TimePCR法檢測細胞內(nèi)Sox17、CTTN基因的mRNA

4、表達水平,通過細胞劃痕和Transwell小室侵襲實驗檢測肝腫瘤細胞遷移、侵襲力。對Sox17基因的表達水平與CTTN的表達量及細胞劃痕、Transwell小室侵襲的實驗結(jié)果進行方差分析檢驗。
　　結(jié)果:與非腫瘤細胞相比,正常人的肝臟上皮細胞QSG-7701中,SOX17的mRNA表達量最高,而CTTN的mRNA表達量最低,SOX17基因mRNA在LM3、HEPG2、MHCC97-L、SK-Hep-1、QSG-7701中的表達量逐

5、級升高,而CTTN的mRNA表達量逐級降低。五組細胞劃痕區(qū)域生長面積均數(shù)分別為16.39％,27.78%,43.33%,64.44%,88.06%。各組間數(shù)據(jù)進行單因素方差分析示P值<0.05,差異有統(tǒng)計學意義;Transwell小室穿膜細胞數(shù)均值依次為17.06、38.35、67.44、165.22、187.53,各組間方差檢驗P值<0.05。在四種肝腫瘤細胞中,Sox17基因的表達水平與CTTN的mRNA的表達水平及細胞劃痕區(qū)域細胞