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文檔簡介
1、目的:高通量篩選系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者血清中差異表達的microRNAs,初步檢測可用于輔助SLE診斷的血清microRNAs標記物。
方法:用TRIzol LS試劑提取血清總RNA,應(yīng)用exiqon microRNA基因芯片技術(shù)高通量檢測10例SLE患者與10例健康對照組血清中microRNAs表達水平;實時熒光定量PCR(realtime PCR)檢測35例SLE患者和25例健康對照組血清microRNAs表達水平,
2、驗證芯片檢測結(jié)果。
結(jié)果:運用GenePix Pro6.0 software分析軟件對microRNA基因芯片結(jié)果數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,結(jié)果顯示:與健康對照組相比,330個microRNAs表達水平在SLE患者血清中異常改變(P<0.05,變化倍數(shù)大于2倍)。其中,139個microRNAs表達上調(diào),191個microRNAs表達下調(diào)。顯著上調(diào)前十位的microRNAs包括:hsa-miR-4708-3p、hsa-miR-5100
3、、hsa-miR-3960、hsa-miR-4722-3p、hsa-miR-5701、hsa-miR-371b-5p、hsa-miR-4467、hsa-miR-3940-5p、hsa-miR-4269、hsa-miR-4454;顯著下調(diào)前十位的microRNAs包括:hsa-miR-224-5p、hsa-miR-493-3p、hsa-miR-4503、hsa-miR-323b-3p、hsa-miR-1246、hsa-miR-4325、h
4、sa-miR-107、hsa-miR-323a-3p、hsa-miR-21-5P、hsa-miR-1285-3p。Realtime PCR驗證部分顯著差異表達的microRNAs。與健康對照組相比,SLE患者血清中顯著高表達的有hsa-miR-4708-3p、hsa-miR-5100及hsa-miR-371b-5p,而表達顯著下調(diào)的有hsa-miR-1246、hsa-miR-4325、hsa-miR-107(P<0.01),與芯片結(jié)果一
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