新型促排劑WSC-DTPA納米粒對(duì)內(nèi)污染鈾促排和防護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：通過細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究水溶性低分子量殼聚糖-二乙烯三氨五乙酸（WSC-DTPA）納米粒對(duì)硝酸鈾酰染毒的HK-2細(xì)胞和SD大鼠促排效果和防護(hù)作用。
　　方法：根據(jù)實(shí)驗(yàn)室已建立的方法制備WSC-DTPA聚合物及其納米粒，再利用電鏡和粒徑儀檢測(cè)納米粒大小。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：采用MTT法檢測(cè)WSC-DTPA納米粒對(duì)硝酸鈾酰染毒的正常腎近曲小管上皮細(xì)胞(HK-2)存活率的影響；流式細(xì)胞儀PI單染法檢測(cè)WSC-DTPA納米粒作用硝酸鈾酰染毒的H

2、K-2細(xì)胞的細(xì)胞周期分布份額變化；流式細(xì)胞儀熒光法檢測(cè)WSC-DTPA納米粒作用硝酸鈾酰染毒的HK-2細(xì)胞內(nèi)的ROS含量；ICP-AES檢測(cè)經(jīng)過WSC-DTPA納米粒作用硝酸鈾酰染毒后的HK-2細(xì)胞內(nèi)鈾含量。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：采用腹腔注射硝酸鈾酰（0.5mgU/kg）方式對(duì)SD大鼠進(jìn)行染毒，即刻尾靜脈注射92.7%WSC-DTPA納米粒、1.59%WSC-DTPA納米粒、WSC納米粒及促排靈（DTPA-Na3Ca），給藥劑量均為60mg/kg。

3、ICP-AES測(cè)量SD大鼠第1天、第2天、第3天的尿和糞中鈾的排出量，以及給藥3天后肝、脾、腎和骨中鈾蓄積量；采用腹腔注射硝酸鈾酰（2.0mgU/kg）方式對(duì)SD大鼠進(jìn)行染毒，相同方式處理，5天后，取肝、腎、脾做病理切片，骨髓作骨髓細(xì)胞涂片，查看病理?yè)p傷程度。評(píng)價(jià)WSC-DTPA納米粒的對(duì)內(nèi)污染鈾的促排和輻射防護(hù)效果。
　　結(jié)果：制備出的WSC-DTPA納米粒經(jīng)檢測(cè)，符合實(shí)驗(yàn)要求。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，MTT法結(jié)果表明，鈾濃度在12.5μg/

4、mL左右HK-2細(xì)胞的存活率接近50%。MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)DTPA-CaNa3和1.59%WSC-DTPA納米粒不能提高12.5μg/mL鈾染毒HK-2細(xì)胞的存活率，而92.7%WSC-DTPA納米粒和WSC納米粒能明顯提高細(xì)胞的存活率（P﹤0.05），并且存活率隨著給藥濃度的增加而提高。流式細(xì)胞PI單染法結(jié)果表明，12.5μg/mL鈾染毒細(xì)胞出現(xiàn)G0/G1期阻滯，該期的DNA含量顯著增高（P﹤0.05），而S期含量明顯減少，G2/M期的含

5、量大致不變，維持在15%左右；DTPA-CaNa3和1.59%WSC-DTPA納米粒不能改善鈾染毒造成的G0/G1期阻滯現(xiàn)象，而92.7%WSC-DTPA納米粒和WSC納米粒能顯著地緩減G0/G1期阻滯。細(xì)胞促排實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與單純?nèi)径荆?.13μg/mL）組相比，DTPA-CaNa3、1.59%WSC-DTPA納米粒、92.7%WSC-DTPA納米粒和WSC納米粒均有促排效果（P﹤0.05），其中1.59%WSC-DTPA納米粒的促排

6、效果最佳，不同時(shí)間給藥實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)立刻給藥的促排效果相對(duì)較好。細(xì)胞內(nèi)ROS含量實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鈾染毒可造成細(xì)胞內(nèi)的ROS含量明顯增加（P﹤0.05），92.7%WSC-DTPA納米粒和WSC納米粒能有效地減少細(xì)胞內(nèi)的ROS含量（P﹤0.05），而1.59%WSC-DTPA納米粒和DTPA-CaNa3不能減少細(xì)胞內(nèi)的ROS含量?？梢?2.7%WSC-DTPA納米粒和WSC納米粒具有抗輻射效果。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在0.5μg/ml鈾染毒實(shí)驗(yàn)中，9

7、2.7%WSC-DTPA納米粒、1.59%WSC-DTPA和DTPA-CaNa3均有促排效果，且1.59% WSC-DTPA納米粒促排效果明顯優(yōu)于DTPA-CaNa3組，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異（P﹤0.05）；給藥組的主要組織鈾蓄積量明顯低于單純?nèi)径窘M，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P﹤0.05）。在2.0μg/ml鈾染毒實(shí)驗(yàn)中，92.7%WSC-DTPA納米粒和WSC納米粒的主要組織鈾蓄積量明顯低于DTPA-CaNa3和1.59%WSC-DTPA

8、納米粒，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異（P﹤0.05）；病理組織切片顯示92.7%WSC-DTPA納米粒和WSC納米粒對(duì)肝、腎有保護(hù)作用，損傷明顯要比其他藥物組輕?？梢娫谳^高劑量鈾染毒的情況下對(duì)組織的防護(hù)作用相對(duì)比較重要的。骨髓圖片的細(xì)胞分類未見有明顯異常。
　　結(jié)論：WSC-DTPA納米粒對(duì)內(nèi)污染鈾有較好促排效果，其中1.59%WSC-DTPA納米粒的促排效果最好；92.7%WSC-DTPA納米粒不僅有促排作用，而且對(duì)鈾染毒的大鼠的肝、腎