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文檔簡介
1、目的:研究正常人骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymalstemcells,MSC)對系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemiclupuserythematosus,SLE)病人B細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用以及SLE血清對MSC調(diào)節(jié)作用的影響。
方法:在添加胎牛血清(FBS)或SLE病人混合血清的細(xì)胞培養(yǎng)液中,共培養(yǎng)正常人骨髓來源的MSC與正常人或SLE病人來源的B細(xì)胞,檢測MSC對B細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用,比較兩種培養(yǎng)體系對MSC的免疫調(diào)節(jié)
2、功能的影響。用細(xì)胞增殖試驗(yàn)檢測B細(xì)胞的增殖情況;用流式細(xì)胞儀檢測B細(xì)胞表面標(biāo)志物,從而分析B細(xì)胞的分化成熟狀況;用ELISA方法檢測B細(xì)胞分泌產(chǎn)生的IgG,IgM水平。
結(jié)果:
1.MSC的培養(yǎng)與分化誘導(dǎo)成功培養(yǎng)獲得正常捐獻(xiàn)者來源的MSC,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測,獲得的MSC不表達(dá)CD34,CD45和CD14,表達(dá)CD44,CD73,CD90,CD105。經(jīng)相應(yīng)誘導(dǎo),所獲MSC可分化為成骨細(xì)胞和成脂細(xì)胞。
2.M
3、SC能抑制B細(xì)胞增殖MSC可以抑制LPS誘導(dǎo)的正常人或SLE病人來源的B細(xì)胞的增殖;在SLE混合血清培養(yǎng)條件下,抑制率高于FBS培養(yǎng)基中的抑制率,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。3.MSC對正常對照組和SLE病人B細(xì)胞成熟的作用
3.1在FBS培養(yǎng)體系中,MSC對B細(xì)胞表達(dá)的CD19無明顯影響,但CD27和CD38的表達(dá)均受到抑制。
3.2在SLE混合血清培養(yǎng)下,MSC對CD19的影響沒有統(tǒng)計學(xué)意義,而CD27和C
4、D38的表達(dá)上升。
4.對正常對照組和SLEB細(xì)胞免疫球蛋白分泌的影響
4.1在FBS培養(yǎng)體系下,MSC下調(diào)正常對照組B細(xì)胞分泌IgG和IgM。
4.2在SLE混合血清培養(yǎng)體系中,MSC下調(diào)正常對照組B細(xì)胞分泌IgG和IgM。MSC也能降低SLE組B細(xì)胞分泌IgG,而IgM的分泌未受明顯影響。
結(jié)論:
1.MSC能抑制SLE病人異?;罨疊細(xì)胞的增殖能力,抑制其成熟,分化及抗體分泌功能。<
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