NMDA受體與生后早期大鼠SVZ細(xì)胞增殖關(guān)系的研究.pdf

1、目的：研究正常生后早期大鼠SVZ細(xì)胞增殖與NMDA受體之間的關(guān)系。
　　方法：正常新生大鼠隨機(jī)分成6組，即正常組、NMDA組、MK-801組、Ro25-6981組、NVP-AAM077組和生理鹽水對(duì)照組。各組再隨機(jī)分成P7d(postnatal7 days)、P14 d、P21 d、P28 d4個(gè)時(shí)間點(diǎn)。在大鼠P3 d時(shí)腹腔注射NMDA受體激動(dòng)劑NMDA(2mg/kg/d)；選擇性非競爭性NMDA受體拈抗劑MK-801(10 mg

2、/kg)；NR2A亞基拈抗劑NVP-AAM077(10 mg/kg)及NR2B亞基拮抗劑Ro25-6981(40mg/kg)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的大鼠在處死前24h腹腔注射BrdU(50 mg/kg)，間隔12h重復(fù)注射一次，再間隔12h分別灌注取腦。石蠟切片，各組行免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry，IHC)染色觀察神經(jīng)干細(xì)胞(Nestin)、BrdU陽性細(xì)胞的變化，正常組另行HE染色。結(jié)果使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行

3、統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，多組間比較行單因素方差分析(one-wayANOVA)，方差齊時(shí)采用LSD法，方差不齊采用Dunnett T3法，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：1.HE染色結(jié)果顯示大鼠生后早期SVZ的細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞密度隨年齡呈下降趨勢。2.BrdU免疫組化結(jié)果顯示在P7 d時(shí)，NMDA組、MK-801組、Ro25-6981組較生理鹽水對(duì)照組減少(P<0.05)：生理鹽水對(duì)照組和

4、NVP-AAM077組較MK-801組增多(P<0.05)。P14 d時(shí)NMDA組、MK-801組、Ro25-6981組較生理鹽水對(duì)照組減少(P<0.05)；生理鹽水對(duì)照組、NMDA組、NVP-AAM077組較MK-801組增多(P<0.05)。P21 d時(shí)NMDA組、Ro25-6981組較生理鹽水對(duì)照組增多(P<0.05)；NMDA組較MK-801組增多(P<0.05)；NVP-AAM077組較MK-801組減少(P<0.05)。P2

5、8 d時(shí)NMDA組較生理鹽水對(duì)照組增多(P<0.05)；NMDA組較MK-801組增多(P<0.05)。3.Nestin免疫組化結(jié)果顯示在P7 d時(shí)NMDA組、MK-801組、Ro25-6981組較生理鹽水對(duì)照組降低(P<0.05)；生理鹽水對(duì)照組、NMDA組和NVP-AAM077組較MK-801組升高(P<0.05)。P14 d時(shí)NMDA組、MK-801組、Ro25-6981組較生理鹽水對(duì)照組降低(P<0.05)；生理鹽水對(duì)照組、NM

6、DA組、NVP-AAM077組較MK-801組有升高(P<0.05)。P21 d時(shí)NMDA組較生理鹽水對(duì)照組升高(P<0.05)。P28 d時(shí)NMDA組、Ro25-6981組較對(duì)生理鹽水照組升高(P<0.05)。
　　結(jié)論：生后早期大鼠SVZ存在大量增殖細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞。這些細(xì)胞在數(shù)量及細(xì)胞密度隨年齡增長呈下降趨勢。適度的激活NMDA受體可以促進(jìn)SVZ中的細(xì)胞增殖，而抑制NMDA受體則會(huì)降低SVZ中的細(xì)胞增殖，這種抑制作用主要是通