多器官功能障礙綜合征(MODS)患者腸道菌群結(jié)構(gòu)與疾病發(fā)生相關(guān)性研究.pdf

1、多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)是由多種因素引起的一種疾病，免疫、遺傳、細(xì)胞凋亡以及腸道菌群結(jié)構(gòu)對(duì)其具有重要影響。越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)腸道是MODS發(fā)生的原動(dòng)力，MODS患者腸道中總厭氧菌和益生菌數(shù)量減少，而病原菌和機(jī)會(huì)性致病菌含量上升，而且具有胃腸功能障礙的MODS患者死亡率較高。因此腸道微生物是MODS發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的重要影響因素。過(guò)去的研究多集中在單個(gè)或多個(gè)細(xì)菌

2、對(duì)于MODS的影響，近年來(lái)隨著高通量分析技術(shù)的發(fā)展，為探明腸道菌群結(jié)構(gòu)與MODS發(fā)生機(jī)理提供了可能。該論文采用DGGE和SOLiD高通量測(cè)序技術(shù)兩種分析方法，分別對(duì)MODS患者及健康對(duì)照腸道菌群結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較分析，以進(jìn)一步探明MODS發(fā)病機(jī)制，推動(dòng)MODS病因的研究，為MODS的臨床治療提供理論依據(jù)。
　　本研究中，我們收集了15例MODS患者和20例正常對(duì)照人群的糞便樣本，提取樣本細(xì)菌總基因組DNA。首先將15例MODS患者按照M

3、ODS評(píng)分從高到低分成3組，分別為：低分組，L組，6例，MODS評(píng)分<5；中分組，M組，5例，MODS評(píng)分在5和10之間(包括5分)；高分組，H組，4例，MODS評(píng)分≥10。然后對(duì)細(xì)菌總基因組DNA的16S rRNA的V3區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，進(jìn)行DGGE圖譜及多樣性分析，分別分析MODS患者及對(duì)照人群腸道菌群的相似性，并通過(guò)Shannon-Weaver(H')指數(shù)來(lái)分析樣本的條帶數(shù)、均勻度指數(shù)、多樣性指數(shù)、豐富度指數(shù)和優(yōu)勢(shì)度指數(shù)。最后挑選

4、了3例MODS患者及3例正常對(duì)照組人群共6例樣本進(jìn)行SOLiD高通量測(cè)序分析。
　　該研究DGGE結(jié)果顯示，L組及H組與對(duì)照組菌群結(jié)構(gòu)差異顯著；L組和M組樣本腸道菌群結(jié)構(gòu)的種類及數(shù)量、優(yōu)勢(shì)菌種類及相對(duì)含量均有顯著差異，L組明顯低于M組。M組與H組樣本相比，患者腸道菌群結(jié)構(gòu)差異不大，無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。L組與H組相比，H組腸道菌群的種類多但是數(shù)量差異不大，優(yōu)勢(shì)菌相對(duì)含量及種類差異顯著。特異條帶切膠回收克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn)，MODS患者腸道中，

5、類桿菌屬(Bacteroides)、不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)、腸球菌屬(Enterococcus)和大腸桿菌(Escherichia)含量相對(duì)較高。SOLiD測(cè)序結(jié)果顯示，3例MODS患者樣本中腸道菌群結(jié)構(gòu)體現(xiàn)了個(gè)體差異性和多樣性，也有一定的相似性，腸球菌屬(Enterococcus)含量均為第一。MODS患者與對(duì)照組人群的腸道菌群相似性較低，優(yōu)勢(shì)菌屬差異較大，提示MODS患者腸道中獨(dú)有的細(xì)菌與疾病有關(guān)，它們與MODS的