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文檔簡(jiǎn)介
1、富含亮氨酸重復(fù)序列的類受體蛋白激酶(Leucine-rich repeat receptor-like protein kinase,LRR-RLKs)家族是植物受體蛋白激酶家族中最大的一個(gè)分支,該基因家族成員廣泛參與植物萌發(fā)、生長(zhǎng)、器官形成、果實(shí)發(fā)育、成熟、激素響應(yīng)、抗病和逆境脅迫防御信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程。
本文首先結(jié)合生物信息學(xué)手段對(duì)楊樹(shù)全部富含亮氨酸受體蛋白激酶家族成員進(jìn)行了表達(dá)譜繪制并得到了12個(gè)在發(fā)育木質(zhì)部、維管形成層、韌皮
2、部特異性表達(dá)的基因;隨后利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化把相應(yīng)基因的啟動(dòng)子-GUS融合表達(dá)載體轉(zhuǎn)入野生型楊樹(shù)INRA7171-B4,每個(gè)基因均獲得ProLRR-RLK::GUS陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子10個(gè)左右。對(duì)移栽8周的轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行GUS組織化學(xué)染色,以檢測(cè)GUS活性、觀察蛋白的細(xì)胞定位;本文還利用基因特異性引物,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)這些基因在野生型楊樹(shù)INRA7171-B4不同維管組織中的表達(dá)進(jìn)行了定量分析。
結(jié)合以上兩種表達(dá)驗(yàn)證手段,最終在
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