產共軛亞油酸丙酸菌的分離及發(fā)酵條件的研究.pdf

1、共軛亞油酸是一種非常重要的不飽和脂肪酸，可看作亞油酸的衍生物。具有抗癌、抗粥狀動脈硬化、提高機體免疫力等頗為引人注意的生理功能，廣泛地應用于醫(yī)藥、食品和飼料等工業(yè)。國外已經(jīng)研究了采用化學方法以及微生物轉化法獲取共軛亞油酸的多種工藝路線。近年來我國在化學方法以及微生物發(fā)酵法生產共軛亞油酸方面已開始有少量的研究報道。 本論文對丙酸菌生物轉化法生成共軛亞油酸展開研究，主要包括產共軛亞油酸的丙酸菌菌種篩選，丙酸菌轉化條件和高密度培養(yǎng)的研

2、究，以及混合微生物轉化工藝的研究等。 本文從青貯飼料和干酪中分離得到的十幾株疑似丙酸菌，對它們進行產共軛亞油酸能力和發(fā)酵產物丙酸的篩選，最終得到3株產共軛亞油酸的丙酸菌，其中一株產共軛亞油酸較高的菌株HZ-P-65(共軛亞油酸產生能力15.743μg/mL)，采用細菌形態(tài)學、電鏡透射與掃描圖像分析、生理生化等研究，初步鑒定該菌株為一株費氏丙酸桿菌。該菌株丙酸產量為9.64g/L，丙酸與乙酸之比接近3.5∶1。 對不同培養(yǎng)

3、基和培養(yǎng)條件進行了初步優(yōu)化得出：培養(yǎng)基為MRS培養(yǎng)基，接種量為10％，培養(yǎng)溫度為30℃，在培養(yǎng)之初加入LA，底物LA濃度為1000μg/mL，轉化時間為120h，添加吐溫-80作分散劑，LA和SO的比為1∶20時，CLA的最高產量達到40.033μg/mL。 研究了發(fā)酵技術對丙酸菌高密度培養(yǎng)及轉化合成CLA的影響。pH-stat培養(yǎng)技術一定程度上克服了因pH值下降、酸積累而引起的抑制作用，菌體密度較高，共軛亞油酸產量也相對提高。

4、丙酸菌在pH6.0進行pH-stat培養(yǎng)，菌體密度可達12.42，CLA產量最高達45.801μg/mL。在此基礎上，進行了間歇補料和連續(xù)補料培養(yǎng)，間歇補料培養(yǎng)菌體OD值最大達18.18，CLA產量最大值達50.934μg/mL；連續(xù)補料培養(yǎng)菌體OD值最大達17.35，CLA產量最大值達55.867μg/mL。 由于丙酸菌和乳酸菌之間存在互生作用，且這兩種菌均能轉化合成共軛亞油酸，所以，我們對丙酸菌和乳酸菌混合培養(yǎng)轉化合成共軛亞