激素誘導(dǎo)下人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂、成骨分化過程中Dickkopf-1表達(dá)水平的實驗研究.pdf

1、目的：闡明Diekkopf-1(Dkk-1)是否在激素誘導(dǎo)下人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Humanbone marrow mesenchymal stem cells hMSC)成脂、成骨反向分化中具有調(diào)節(jié)作用,為進(jìn)一步研究其在糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥中的作用奠定理論基礎(chǔ)。
　　 方法:1.體外培養(yǎng)hM-SC,并激素誘導(dǎo)其向脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞分化。2.運用流式細(xì)胞術(shù)鑒定hMSC,油紅O染色鑒定脂肪細(xì)胞,Von Kossa染色和堿性磷酸酶染

2、色鑒定成骨細(xì)胞。3.運用Real time-PCR檢測Dkk-1在hMSC、hMSC體外誘導(dǎo)成脂和成骨分化過程中不同時間點(24時、5天、9天、13天、17天、21天、25天)的相對表達(dá)量。
　　 結(jié)果:1.體外成功培養(yǎng)hMSC,經(jīng)流式細(xì)胞學(xué)鑒定,hMSC為純化的細(xì)胞群體。2.激素誘導(dǎo)hMSC向脂肪細(xì)胞及成骨細(xì)胞分化,成脂誘導(dǎo)組油紅O染色陽性,成骨誘導(dǎo)組Von Kossa染色及堿性磷酸酶染色陽性。3.Dkk-1在hMSC、hMS