潰瘍性結(jié)腸炎患者腸黏膜干擾素γ與緊密連接蛋白的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　 潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種累及直腸和結(jié)腸黏膜的慢性非特異性炎癥性疾病，其病因和發(fā)病機(jī)制至今尚未完全明確，也無理想的根治方法。有證據(jù)表明多種細(xì)胞因子，如γ干擾素(interferon-γ，IFN-γ)等所調(diào)節(jié)的免疫異常在UC的發(fā)病中起到很重要的作用，且UC患者存在結(jié)腸黏膜上皮屏障結(jié)構(gòu)異常導(dǎo)致的屏障功能障礙。本研究通過檢測(cè)UC患者結(jié)腸黏膜IFN-γ、緊密連接蛋白o(hù)ccludin、z

2、o-1及其基因OCLN、ZO-1的表達(dá)情況，分析IFN-γ與緊密連接蛋白表達(dá)及其與UC臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性，探討UC發(fā)病中IFN-γ是否與緊密連接蛋白的異常表達(dá)有關(guān)，以期更進(jìn)一步明確UC的發(fā)病機(jī)制，為尋找新的治療靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 材料和方法:
　　 選擇UC患者40例，其中活動(dòng)期28例，緩解期12例;20例健康查體者為正常對(duì)照組。經(jīng)結(jié)腸內(nèi)鏡活檢獲得60例新鮮的結(jié)腸黏膜標(biāo)本。從結(jié)腸黏膜組織中提取總RNA，應(yīng)用實(shí)時(shí)

3、熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR(Real-time qRT-PCR)檢測(cè)結(jié)腸黏膜組織中OCLN、ZO-1基因的表達(dá);應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)結(jié)腸黏膜中IFN-γ、occludin和zo-1的表達(dá)及分布。
　　 結(jié)果:
　　 1.IFN-γ在結(jié)腸黏膜中的表達(dá)UC患者結(jié)腸黏膜組織中IFN-γ的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，其中DAI分期的重度UC患者IFN-γ的表達(dá)明顯高于輕中度及緩解期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義(P＜0.01)。但與組織學(xué)分級(jí)無明顯關(guān)系，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.OCLN、ZO-1基因在結(jié)腸黏膜中的表達(dá)UC組OCLN、ZO-1基因的表達(dá)均明顯低于正常對(duì)照組，分別是其表達(dá)水平的0.285、0.266倍，兩組相比，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但OCLN、ZO-1的表達(dá)水平與UC患者性別、年齡、DAI分期、組織學(xué)分級(jí)等無明顯關(guān)系，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3.occ

5、ludin和zo-1在結(jié)腸黏膜中的表達(dá)UC患者結(jié)腸黏膜組織中occludin和zo-1的表達(dá)均明顯低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但其表達(dá)與UC患者的DAI分期、組織學(xué)分級(jí)之間無明顯關(guān)系，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4.IFN-γ與OCLN、ZO-1基因、occludin及zo-1蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析在UC患者中，IFN-γ的表達(dá)水平與OCLN、ZO-1基因、occludin及zo-1蛋白的表達(dá)

6、水平均呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.298、-0.325、-0.794、-0.820(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.UC患者結(jié)腸黏膜組織中緊密連接蛋白o(hù)ccludin、zo-1及其基因OCLN、ZO-1的表達(dá)均較正常對(duì)照降低，提示在UC中存在結(jié)腸黏膜緊密連接蛋白表達(dá)的下降，導(dǎo)致腸黏膜屏障功能的減低，因而在UC的發(fā)病中起到重要作用。
　　 2.UC患者結(jié)腸黏膜組織中IFN-γ的表達(dá)較正常對(duì)照升高，且與疾