間質(zhì)性膀胱炎動(dòng)物模型去勢(shì)對(duì)其膀胱肥大細(xì)胞的影響研究.pdf

1、目的：
　　1、通過(guò)膀胱內(nèi)灌注硫酸魚(yú)精蛋白(Protaminesulfate，PS)建立間質(zhì)性膀胱炎(InterstitialCystitis，IC)動(dòng)物模型。
　　2、通過(guò)研究雙側(cè)卵巢切除對(duì)IC大鼠模型膀胱形態(tài)學(xué)、膀胱肥大細(xì)胞數(shù)目及狀態(tài)的變化，來(lái)明確女性激素在間質(zhì)性膀胱炎發(fā)病中的作用。
　　材料及方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象
　　成年雌性SD大鼠，鼠齡6-8周，體重193～255克，平均233.5g。

2、　　2.主要試劑
　　硫酸魚(yú)精蛋白粉劑(ProtaminesulfateGradeX)：SIGMA公司；血清17β-雌二醇Elisa試劑盒：IBL公司；血清孕激素Elisa試劑盒：IBL公司；甲苯胺藍(lán)：天津市泌尿外科研究所提供。
　　3.方法
　　30只成年雌性SD大鼠隨機(jī)分為3組：卵巢切除+硫酸魚(yú)精蛋白組(OVX+PS組)、假手術(shù)+PS組(SHAM+PS組)和正常對(duì)照組(假手術(shù)+生理鹽水組，SHAM+NS組)。三組大

3、鼠手術(shù)后間斷測(cè)定血清17β-雌二醇與孕激素水平，當(dāng)雌性激素水平恒定后(約一個(gè)月)分別給予硫酸魚(yú)精蛋白或生理鹽水膀胱灌注。60天后處死大鼠并切取膀胱，HE染色觀(guān)察膀胱粘膜變化及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況，甲苯胺藍(lán)染色標(biāo)記并計(jì)數(shù)肥大細(xì)胞，透射電鏡觀(guān)察肥大細(xì)胞活性狀態(tài)。
　　4.統(tǒng)計(jì)與分析
　　采用IBMSPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，符合正態(tài)分布的資料應(yīng)用x±s描述。兩組獨(dú)立樣木采用Student't檢驗(yàn)，組間比較采用單

4、因素方差分析，α=0.05。
　　結(jié)果：
　　1.OVX+PS組大鼠雙側(cè)卵巢切除后，其血清17β-雌二醇與孕酮水平均降低，約1月左右降至最低水平并維持恒定。與術(shù)前及假手術(shù)組(SHAM+PS組和SHAM+NS組)相比，差異均育統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　2.正常對(duì)照組(sHAM+Ns組)膀胱粘膜未見(jiàn)明顯損傷，粘膜固有層未見(jiàn)明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。PS灌注組(OVX+PS組與SHAM+PS組)之間膀胱粘膜改變沒(méi)有明顯差異，

5、均表現(xiàn)出明顯損傷，但損傷表現(xiàn)不均勻，部分區(qū)域膀胱粘聯(lián)上皮剝脫或局部潰瘍形成，部分區(qū)域粘膜上皮細(xì)胞增生明顯，粘膜下層可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　3.與正常對(duì)照組相比，OVX+PS組、SHAM+PS組膀胱粘膜固有層、逼尿肌和漿膜層肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；而OVX+PS組和SHAM+PS組相比，其粘膜固有層、逼尿肌及漿膜層肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　4.在粘膜固有層與逼

6、尿肌，OVX+PS組與SHAM+NS組脫顆粒肥大細(xì)胞所占百分比均明顯低于SHAM+PS組(P<0.01)。在粘膜層，OVX+PS組脫顆粒肥大細(xì)胞百分比均較SHAM+NS組明顯減少(P<0.01)；而在逼尿肌，OVX+PS組與SHAM+NS組脫顆粒肥大細(xì)胞百分比沒(méi)有明顯差距，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；在漿膜層，SHANI+NS組肥大細(xì)胞極少，未見(jiàn)明顯脫顆粒肥大細(xì)胞，OVX+PS組脫顆粒肥大細(xì)胞百分比較SHAM+PS組明顯下降(

7、P<0.01)。
　　5.透射電鏡觀(guān)察發(fā)現(xiàn)SHAM+NS組與OVX+PS組膀胱組織內(nèi)絕大多數(shù)肥大細(xì)胞處于未脫顆粒狀態(tài)，胞漿內(nèi)含有大量均一的、完整的、電子致密的顆粒，脫顆粒肥大細(xì)胞占肥大細(xì)胞總數(shù)的30％以下。而SHAM+PS組大鼠膀胱組織內(nèi)多數(shù)肥大細(xì)胞呈部分脫顆?；蛲耆擃w粒狀態(tài)，脫顆粒細(xì)胞可達(dá)70％以上。
　　結(jié)論：
　　1、硫酸魚(yú)精蛋白(PS)膀胱灌注可以建立病理組織學(xué)表現(xiàn)較為典型的IC動(dòng)物模型。通過(guò)反復(fù)、長(zhǎng)時(shí)間PS

8、灌注，大鼠膀胱上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)形態(tài)發(fā)生持續(xù)性改變，膀胱粘膜固有層、逼尿肌甚至漿膜層均可見(jiàn)肥大細(xì)胞增多與脫顆粒。上述改變與在IC患者膀胱變化相似。這一膀胱上皮損傷模型的建立為IC以及腺性膀胱炎、放射性膀胱炎等其他膀胱炎性疾病的研究提供了成熟的模型基礎(chǔ)。
　　2、女性激素(雌激素和孕激素)對(duì)IC患者膀胱粘膜的損傷和膀胱壁各層組織肥大細(xì)胞數(shù)量的變化沒(méi)有明顯的影響，但是可顯著影響IC患者膀胱內(nèi)肥大細(xì)胞的活化。因此降低IC患者體內(nèi)女性激素的含量