Trihydrophobin 1促進(jìn)雄激素受體降解及其在乳腺癌進(jìn)展過程中作用的研究.pdf

1、第一部分Trihydrophobin1通過促進(jìn)雄激素受體降解抑制雄激素信號(hào)機(jī)制的研究
　　雄激素信號(hào)通路在前列腺的發(fā)育、前列腺增生以及前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中起極其重要的作用。本實(shí)驗(yàn)室之前的研究發(fā)現(xiàn)trihydrophobin1(TH1)蛋白在前列腺高表達(dá)。在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中TH1均可以與雄激素受體相互作用，并且抑制雄激素受體的轉(zhuǎn)錄活性和內(nèi)源性前列腺特異性抗原的表達(dá)。TH1還能夠與雄激素受體一同與具有雄激素反應(yīng)性的前列腺特異性抗原啟動(dòng)子

2、相互結(jié)合，表明TH1參與了雄激素受體轉(zhuǎn)錄調(diào)控其下游基因的過程。在本論文中，我們發(fā)現(xiàn)在TH1抑制雄激素信號(hào)通路的過程中TH1能夠誘導(dǎo)雄激素受體蛋白水平的降低，促進(jìn)了雄激素受體的泛素化降解，但是TH1不影響雄激素受體的入核。而雄激素受體的穩(wěn)定性受它N/C端的相互作用影響，TH1可以抑制雄激素受體的N/C端相互作用，但是并不單獨(dú)參與雄激素受體N端或C端的降解?；谝陨蠈?shí)驗(yàn)結(jié)果，我們提出TH1能夠通過促進(jìn)雄激素受體的泛素化降解來抑制雄激素信號(hào)的

3、傳導(dǎo)。這些結(jié)果還提示TH1可能直接參與雄激素相關(guān)的一些發(fā)育以及生理病理過程。
　　第二部分Trihydrophobin1在乳腺癌進(jìn)展過程中的功能機(jī)制的研究
　　TH1是負(fù)性轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)因子復(fù)合體中的一個(gè)成員，與該復(fù)合體的其他亞基一同參與轉(zhuǎn)錄暫停。盡管有研究發(fā)現(xiàn)負(fù)性轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)因子復(fù)合體可以抑制雌激素受體α介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄，但是沒有研究報(bào)導(dǎo)TH1與腫瘤的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。在本論文中，我們發(fā)現(xiàn)TH1的蛋白水平與人類乳腺癌的進(jìn)展呈負(fù)相關(guān)。免疫組化

4、實(shí)驗(yàn)顯示TH1蛋白在乳腺癌臨床Ⅲ-Ⅳ期患者的乳腺癌組織中的表達(dá)明顯低于乳腺癌臨床Ⅰ-Ⅱ期的患者(P<0.01)。而在發(fā)生3個(gè)以上轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的乳腺癌組織中TH1的蛋白水平明顯低于3個(gè)及以下淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的乳腺癌組織(P<0.001)。為了進(jìn)一步研究TH1在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的分子機(jī)制，我們?cè)贛DA-MB-231細(xì)胞中制作了TH1過表達(dá)的穩(wěn)轉(zhuǎn)株，并且用RNA干擾的方法制作了在MCF-7細(xì)胞中TH1持續(xù)性下調(diào)的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。我們可以觀察到TH

5、1可以抑制乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖，但是對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用不大。TH1還能夠降低細(xì)胞周期蛋白D1的蛋白水平，上調(diào)CDK抑制子p21的蛋白水平，使乳腺癌細(xì)胞發(fā)生G0/G1期的細(xì)胞周期阻滯。TH1還可以降低β-catenin的水平并且抑制ERK的活性。此外，TH1可以抑制乳腺癌細(xì)胞的遷移和運(yùn)動(dòng)，在劃痕實(shí)驗(yàn)中，TH1抑制了傷痕的修復(fù)，抑制了上皮間質(zhì)化分子標(biāo)記的相應(yīng)改變，提示TH1可能抑制乳腺癌細(xì)胞的侵襲能力。以上結(jié)果顯示TH1能夠抑制乳腺癌細(xì)胞