CLEC-1在小膠質(zhì)細(xì)胞活化中作用的研究及CLEC-1促進(jìn)乳腺癌進(jìn)展的研究.pdf

1、第一部分 CLEC-1在小膠質(zhì)細(xì)胞活化中作用的研究
　　 中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)損傷后，小膠質(zhì)細(xì)胞靜息狀態(tài)的打破，是小膠質(zhì)細(xì)胞活化并導(dǎo)致CNS內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)破壞，損傷病變加重的關(guān)鍵步驟，本部分主要研究小膠質(zhì)細(xì)胞維持靜息狀態(tài)的分子機(jī)制。C型凝集素樣受體分子1(C-type lectin-likereceptor-1，CLEC-1)是由NKC編碼的一種免疫細(xì)胞模式識(shí)別受體。最近的研究表明CLEC-1參與調(diào)節(jié)Th17的分化，并與大鼠移植物

2、耐受模型中機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)密切相關(guān)。
　　 本文首次證實(shí)CLEC-1在小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)，并提出在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的過(guò)程中，CLEC-1的表達(dá)呈動(dòng)態(tài)改變。過(guò)表達(dá)外源性的CLEC-1將抑制炎性環(huán)境對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化作用。盡管CLEC-1表達(dá)的高低在LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)初期并沒(méi)有明顯影響小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)一系列細(xì)胞因子的釋放，但免疫調(diào)節(jié)負(fù)性調(diào)節(jié)因白介素-10(interleukin-10，IL-10)能顯著上調(diào)CLEC-1的水

3、平。同時(shí)，在IL-10負(fù)反饋調(diào)節(jié)Toll樣受體4(Toll like receptor4，TLR4)表達(dá)的過(guò)程中，外轉(zhuǎn)CLEC-1明顯抑制LPS對(duì)于TLR4的活化。此外，過(guò)表達(dá)CLEC-1可以促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞凋亡。以上結(jié)果提示：CLEC-1可能作為IL-10下游分子負(fù)反饋調(diào)節(jié)TLR4，并通過(guò)促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡從而參與對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的負(fù)性調(diào)節(jié)。
　　 綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)CLEC-1是小膠質(zhì)細(xì)胞活化的調(diào)節(jié)蛋白。在炎癥因素誘導(dǎo)膠質(zhì)

4、細(xì)胞活化的過(guò)程中，CLEC-1可能通過(guò)1)參與IL-10的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制影響TLR4.的表達(dá)，2)誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡，在CNS炎癥病程的進(jìn)展扮演重要的角色。
　　 第二部分 CLEC-1促進(jìn)乳腺癌進(jìn)展的研究
　　 乳腺癌的發(fā)病和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟、多環(huán)節(jié)、多因素參與的連續(xù)復(fù)雜過(guò)程。而腫瘤細(xì)胞和免疫系統(tǒng)的對(duì)話所形成的炎性或免疫狀態(tài)呈負(fù)性的微環(huán)境格局，在調(diào)控腫瘤的轉(zhuǎn)移和進(jìn)展方面有重要的作用。CLEC-1是模式識(shí)別受體C型凝集

5、素樣受體家族的一員，之前的研究顯示，CLEC-1在體外大鼠樹(shù)突狀細(xì)胞表達(dá)的抑制可能增加T細(xì)胞異體的Th17分化，減少調(diào)節(jié)性Foxp3+T細(xì)胞數(shù)量，提示它與負(fù)性免疫調(diào)節(jié)相關(guān)。但到目前為止。CLEC-1在腫瘤發(fā)生中的作用迄今為止仍未見(jiàn)報(bào)道，它在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中所扮演的角色尚不明確。
　　 在本部分的研究中，首次發(fā)現(xiàn)CLEC-1在乳腺癌組織中高表達(dá)，通過(guò)對(duì)145例中國(guó)婦女乳腺癌標(biāo)本的分析，發(fā)現(xiàn)CLEC-1表達(dá)水平與腫瘤分級(jí)、腫瘤

6、大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況相關(guān)。細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)證實(shí)：穩(wěn)轉(zhuǎn)CLEC-1的乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231在軟瓊脂上的成瘤能力比對(duì)照組明顯提高；過(guò)表達(dá)CLEC-1的MDA-MB-231與MCF-7細(xì)胞侵襲能力與對(duì)照組相比明顯增強(qiáng)；同時(shí)，CLEC-1對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖、遷移等能力無(wú)明顯影響。這些結(jié)果與在乳腺癌組織中的發(fā)現(xiàn)一致。進(jìn)一步的研究表明，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子TGF-β能誘導(dǎo)CLEC-1表達(dá)，細(xì)胞內(nèi)CLEC-1的表達(dá)水平與基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9的表達(dá)