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1、目的:探索腦膠質(zhì)瘤中與HH/GLI1信號(hào)通路相關(guān)的差異microRNA表達(dá)譜,并分析其作用機(jī)制。
方法:通過(guò)microRNA基因芯片技術(shù),在腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本中篩選出與HH/GLI1信號(hào)通路活性相關(guān)的差異microRNA表達(dá)譜。通過(guò)RT-PCR方法驗(yàn)證基因芯片的可靠性。然后在擴(kuò)大樣本中驗(yàn)證差異microRNA的表達(dá)。使用生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)microRNA的靶基因,并結(jié)合熒光素酶報(bào)告基因載體系統(tǒng)證實(shí)microRNA與靶基因的結(jié)合。
2、
結(jié)果:通過(guò)microRNA基因芯片技術(shù)在不同HH/GLI1信號(hào)通路活性的腦膠質(zhì)標(biāo)本中篩選出22個(gè)差異表達(dá)microRNA。在HH/GLI1高活性組中,miR-144等9個(gè)基因表達(dá)上調(diào),miR-125b等13個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。RT-PCR方法證實(shí)miR-144和miR-125b的表達(dá)與基因芯片結(jié)果相符。在擴(kuò)大樣本中應(yīng)用RT-PCR方法證實(shí)HH/GLI1信號(hào)通路高活性的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本中miR-125b呈低表達(dá)。生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)
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