斜帶石斑魚吡哆醇、硫胺素、核黃素和煙酸的營(yíng)養(yǎng)生理研究.pdf

1、本論文系統(tǒng)地進(jìn)行了斜帶石斑魚(印inephelus coioides)吡哆醇、硫胺素、核黃素和煙酸的營(yíng)養(yǎng)生理研究。主要結(jié)果如下： (1)采用7組添加不同吡哆醇水平(0、1、2、4、8、16、32 mg kg<'-1>飼料)的等氮等能純化飼料，飼喂初始重14.83±0.31 g的斜帶石斑魚8周，研究飼料吡哆醇水平對(duì)斜帶石斑魚生理生化指標(biāo)的影響。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行至第3周，缺乏組開始出現(xiàn)死亡率高、抽搐、螺旋狀游泳、刺激感受性亢進(jìn)等癥狀；1 m

2、g kg<'-1>組在第6周時(shí)也出現(xiàn)輕微的螺旋狀游泳。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，缺乏組臟體比、肝體比和全血血紅蛋白濃度都低于添加組，而肥滿度和脂體比在各組間沒(méi)有顯著性差異。脾指數(shù)和肝臟超氧化物歧化酶(SOD)活性都在缺乏組顯著低于添加組，且在各個(gè)處理組間呈現(xiàn)出相似的規(guī)律性，二者從兩個(gè)不同的側(cè)面展示了吡哆醇對(duì)斜帶石斑魚的免疫系統(tǒng)有影響。低劑量(0和1 mg kg<'-1>)組肝臟氨基酸代謝酶谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性顯著低于其它添加組，表明其氨基酸代謝狀

3、態(tài)比其它添加組差。通過(guò)折線模型模擬得出，斜帶石斑魚用于維持正常的成活率、全血血紅蛋白濃度、肝臟GPT活性和SOD活性所需的飼料吡哆醇水平分別為1.75，1.87，2.22和2.05 mg kg<'-1>飼料，但考慮到GPT是氨基酸代謝的主要酶類之一，而氨基酸代謝在魚類物質(zhì)代謝中又極為重要，因此飼料中吡哆醇的添加水平應(yīng)不低于2.22mgkg<-1>飼料。 (2)采用6組含有不同硫胺素水平(0.08、0.50、2.12、3.15、4

4、.63、12.37mg kg<'-1>飼料)的等氮等能純化飼料，飼喂初始重16.97±0.14 g的斜帶石斑魚10周，研究飼料硫胺素水平對(duì)斜帶石斑魚生理生化指標(biāo)的影響。實(shí)驗(yàn)期間，缺乏組沒(méi)有出現(xiàn)明顯的表觀缺乏癥狀。肥滿度在低劑量(0.08和0.50 mg kg<'->)組較高，而臟體比、肝體比、肝糖原含量和全血血紅蛋白濃度在各組間沒(méi)有顯著性差異。肝臟磷酸戊糖途徑關(guān)鍵酶轉(zhuǎn)酮醇酶活性在低劑量(0.08和0.50 mg kg<'-1>)組低于其

5、它添加組。斜帶石斑魚肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化程度在硫胺素缺乏組最高，但實(shí)驗(yàn)魚的肝臟SOD活性不受飼料硫胺素水平的影響。綜合考慮硫胺素對(duì)各生理生化指標(biāo)的影響，本研究認(rèn)為斜帶石斑魚飼料中硫胺素含量應(yīng)不小于3.15 mgkg<'-1>飼料。 (3)采用6組添加不同核黃素水平(0、2、4、6、9、12 mg kg<'-1>飼料)的等氮等能純化飼料，飼喂初始重14.90±0.46 g的斜帶石斑魚12周，研究飼料核黃素水平對(duì)斜帶石斑魚氨基酸代謝酶和抗

6、氧化系統(tǒng)的影響以及斜帶石斑魚飼料中適合的核黃素添加量。結(jié)果顯示，增重率在缺乏組略低，在9 mg kg<'-1>組最高。缺乏組全血血紅蛋白濃度、肥滿度、臟體比、肝體比和脂體比都低于各添加組，但沒(méi)有出現(xiàn)其它明顯的表觀缺乏癥狀。攝食量、飼料系數(shù)和成活率在各組間均沒(méi)有差異。肝臟D-氨基酸氧化酶(D-AAO)活性隨著飼料核黃素水平的升高明顯上升。與其它添加組相比，低劑量(和2 mg kg<'-1>)組的肝臟GPI’活性較低，而GPT’活性系數(shù)(G

7、PT-AC)較高，表明實(shí)驗(yàn)魚的吡哆醇營(yíng)養(yǎng)狀況以及氨基酸代謝都受到核黃素營(yíng)養(yǎng)狀況的影響?？紤]到氨基酸代謝對(duì)于魚類的重要性，因而，在確定斜帶石斑魚的核黃素需要量時(shí)，除了使用生長(zhǎng)或D-AAO活性等常規(guī)指標(biāo)外，有必要同時(shí)考慮魚體的氨基酸代謝受飼料核黃素水平影響的狀況。綜合考慮本實(shí)驗(yàn)中各生理生化指標(biāo)受飼料中核黃素水平影響的情況，本研究認(rèn)為，斜帶石斑魚飼料中核黃素的添加水平應(yīng)不低于6.14 mg kg<'-1>飼料。核黃素缺乏或不足導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)魚肝臟脂

8、質(zhì)過(guò)氧化程度較高，且與6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)活性之間存在極顯著正相關(guān)性。肝臟SOD活性和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性都在缺乏組顯著低于添加組，且二者具有顯著正相關(guān)性。飼料核黃素水平對(duì)實(shí)驗(yàn)魚肝臟谷胱甘肽(GSH)濃度以及依賴于GSH的谷胱甘肽還原酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶(GST)等抗氧化酶活性都沒(méi)有顯著性影響。 (4)采用4組等氮等能純化飼料，核黃素/吡哆醇的添加量(mg kg<'-1>飼料)

9、分別為：I(0/0)、Ⅱ(0/50)、Ⅲ(200/0)和Ⅳ(200/50)，飼喂初始重39.07±0.30g的斜帶石斑魚18天。從實(shí)驗(yàn)進(jìn)行第10天起，吡哆醇和核黃素都缺乏的I組和只缺乏吡哆醇的Ⅲ組均出現(xiàn)高死亡率以及刺激感受性亢進(jìn)、螺旋狀游泳和抽搐等神經(jīng)癥狀，而核黃素的缺乏加劇了吡哆醇缺乏癥的發(fā)生。產(chǎn)生神經(jīng)癥狀的直接原因之一是實(shí)驗(yàn)魚腦部的谷氨酸含量較高。實(shí)驗(yàn)魚的吡哆醇營(yíng)養(yǎng)狀況以及肝臟氨基酸代謝酶GPT?；钚缘淖兓謩e受到飼料吡哆醇水平和核

10、黃素水平的極顯著性影響，并存在這兩個(gè)因素間的交互作用。葡萄糖無(wú)氧酵解過(guò)程的標(biāo)志酶之一乳酸脫氫酶(I,DH)的活性在吡哆醇和核黃素同時(shí)缺乏的I組顯著高于其它處理組，并分別受到飼料吡哆醇水平和核黃素水平的顯著性影響。 (5)采用6組添加不同煙酸水平(0、5、10、25、50、80 mg kg<'-1>飼料)的等氮等能純化飼料，飼喂初始重6.35±0.20 g的斜帶石斑魚9周，研究飼料煙酸水平對(duì)斜帶石斑魚糖代謝和抗氧化系統(tǒng)的影響以及斜

11、帶石斑魚飼料中適合的煙酸添加量。結(jié)果顯示，缺乏組增重率比添加組略低，但沒(méi)有出現(xiàn)其它明顯的表觀缺乏癥狀。肝臟NAD濃度在各組間沒(méi)有顯著性差異，而NADP濃度隨著飼料煙酸水平的升高呈線性上升，因而二者都不適合用于評(píng)價(jià)斜帶石斑魚的煙酸營(yíng)養(yǎng)狀況。肝臟磷酸戊糖途徑關(guān)鍵酶G6PDH和6PGDH的活性在煙酸缺乏組都較低。肝臟糖酵解酶醛縮酶(ALD)和LDH活性在低劑量(0和5 mg kg<'-1>)組高于其它添加組，而三羧酸循環(huán)關(guān)鍵酶蘋果酸脫氫酶(M

12、DH)活性在添加量25 mg kg<'-1>的各組都較低。在腦部，雖然ALD活性在各組間沒(méi)有顯著性差異，但LDH和膽堿能系統(tǒng)的乙酰膽堿酯酶活性在低劑量(0和5mg kg<'-1>)組低于其它添加組，表明煙酸缺乏或不足對(duì)實(shí)驗(yàn)魚腦部的糖代謝和膽堿能系統(tǒng)都有影響。綜合考慮煙酸對(duì)斜帶石斑魚各生理生化指標(biāo)的影響情況，本研究認(rèn)為，斜帶石斑魚飼料中煙酸的添加量不能低于27.50 mg kg<'-1>飼料。煙酸缺乏導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)魚肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化程度較添加組高