斜帶石斑魚生長抑制激素受體的克隆、表達(dá)和功能研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文斜帶石斑魚生長抑制激素受體的克隆、表達(dá)和功能研究姓名：董海燕申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：海洋生物學(xué)指導(dǎo)教師：林浩然20100604中山大學(xué)博士論文董海燕2010年6月端發(fā)現(xiàn)了一段由11個(gè)連續(xù)的絲氨酸“SSSSSSSSSSS”組成的序列。與其它脊椎動(dòng)物氨基酸序列同源性分析和進(jìn)化樹分析發(fā)現(xiàn)，斜帶石斑魚四個(gè)生長抑素受體有兩個(gè)大的進(jìn)化支：一支是SSTRl，另一支是SSTR2／3／5。SSTR2在進(jìn)化過程中較為保守，而SSTRI，

2、3和5進(jìn)化中分歧較大。斜帶石斑魚SSTRl，2，3和5和已知的其他脊椎動(dòng)物的相應(yīng)受體分別展現(xiàn)了526669％，612722％，452845％和493584％的氨基酸序列一致性。但斜帶石斑魚四種受體間僅有341467％的序列一致性。同源性分析表明斜帶石斑魚SSTRs在同一類型的受體間的同源性要比不同受體類型間的同源性高。此外，在http：／／wwwensemblorg數(shù)據(jù)庫中，利用tblastn工具，我們發(fā)現(xiàn)在斑馬魚，棘魚，河豚和蛙的基因

3、組序列中都含與哺乳類SSTR4類似序列。當(dāng)在進(jìn)化樹中加入這些通過基因組推測來的編碼蛋白后，魚類和哺乳類一樣都包括SSTRl／4和SSTR2／3／5兩個(gè)大的進(jìn)化支，而已經(jīng)報(bào)道的虹鱒的SSTRlA和SSTRlB及斑馬魚的SSTRlA都與已知的哺乳類和鳥類的SSTR4歸為一類。2通過RTPCR結(jié)合Southernblot對SSTR2的表達(dá)研究表明，斜帶石斑魚SSTR2mRNA在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，垂體，卵巢，胃，腸，胸腺，視網(wǎng)膜和肝臟都有表達(dá)。在胚

4、胎和幼魚發(fā)育階段斜帶石斑魚SSTR2mRNA，在未受精的卵中有表達(dá)，但受精后母體攜帶的SSTR2mRNA表達(dá)消失，原腸期開始表達(dá)，出膜時(shí)達(dá)到較高水平，此后的所有仔魚期SSTR2mRNA都有表達(dá)。利用定量的方法比較分析了斜帶石斑魚四種SSTRs在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的前腦，中腦，后腦，脊髓和垂體以及外周組織肝臟，胃，腸，胸腺，視網(wǎng)膜，卵巢共11個(gè)組織的表達(dá)特性。除了在胃腸沒有檢測到SSⅡ匕和在視網(wǎng)膜沒檢測到SSTR5外，其他組織均有四種受體的表達(dá)

5、?？偟膩碚f，SSTRmRNAs在中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)量要高于外周組織。端腦中SSTRlmRNA的表達(dá)量最高，其他組織表達(dá)量相對較低。SSTR2mRNA在垂體中表達(dá)量最高，其次是肝臟和端腦，然后是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其他組織和外周組織。SSTR3mRNA也是在垂體中表達(dá)量最高，在前腦，肝臟，胃中SSTR3mRNA的量也很豐富。SSTR5mRNA水平除垂體外其他組織均很低。在斜帶石斑魚7個(gè)胚胎發(fā)育時(shí)期和5個(gè)仔魚時(shí)期四種SSTR的表達(dá)變化很大。SSTR