

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文檔簡介
1、目的:
探討MSI2基因的表達(dá)對K562細(xì)胞BCR-ABL融合基因表達(dá)的影響,以了解下調(diào)MSI2基因后對細(xì)胞增殖產(chǎn)生的影響,尋找慢粒治療的潛在靶點(diǎn)。
材料與方法:
1.Western blot和熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測轉(zhuǎn)染后MSI2的表達(dá);
2.RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后BCR-ABL融合基因的表達(dá);
3.CFSE染色法檢測細(xì)胞增殖。
結(jié)果:
1
2、.Western blot和熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測可見轉(zhuǎn)染后MSI2表達(dá)明顯降低;熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測轉(zhuǎn)染后k562細(xì)胞MSI2表達(dá)明顯下降,空白組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組相對定量(RQ)值分別為(1±0),(0.954±0.072),(0.302±0.041),空白組和實(shí)驗(yàn)組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組(P 均<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;western blot檢測轉(zhuǎn)染后k562細(xì)胞MSI2表達(dá)明顯下降,空白組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組MSI2/β
3、-actin 灰度值比值分別為(0.832±0.029),(0.766±0.031),(0.537±0.083),空白組和實(shí)驗(yàn)組(P<0.001)、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組(P<0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
2.RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后k562細(xì)胞BCR-ABL基因的表達(dá)明顯下降,空白、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組BCR-ABL/GAPDH 灰度值比值分別為(0.834±0.047),(0.848±0.030),(0.639±0.041),
4、空白組和實(shí)驗(yàn)組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組差(P 均<0.001)異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;。
3.流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的增殖指數(shù)較對照明顯降低,空白組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組24h 增殖指數(shù)分別為(2.88±0.122),(2.73±0.126),(2.01±0.179),48h 增殖指數(shù)分別為(3.40±0.121)(3.21±0.086)(2.54±0.234),72h 增殖指數(shù)分別為(10.78±0.706)(9.98±0.242)
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