外周血白細(xì)胞BCR-ABL基因產(chǎn)物分析及其臨床應(yīng)用.pdf

1、慢性髓性白血病(Chrorlic Myelogenous LelJkemia,CML)是一種常見的骨髓干細(xì)胞惡性增生性疾病,發(fā)病率居各種白血病第三位,僅次于急性粒細(xì)胞性白血病(AGL)和急性淋巴細(xì)胞性白血病(ALL),約60-70﹪患者死于慢性急變,絕大多數(shù)慢性髓性白血病患者的白細(xì)胞中都有細(xì)胞學(xué)標(biāo)志物Ph染色體,該染色體為9號染色體與22號染色體發(fā)生部分遺傳物質(zhì)易位形成的,同時也形成兩種融合基因即ABL/BCR和BCR/ABL,后一種基

2、因可以表達(dá)出分子量為210 KDa的微量融合蛋白(P<,210><'bcr/abl>).在95﹪以上的慢性髓性白血病融合蛋白是呈陽性的,檢測P<,210><'bcr/abl>蛋白可以準(zhǔn)確和特異地診斷慢性髓性白血病.基于這種理論我們建立了這一研究課題. 本研究的目的是建立一種新的適合于我們實驗室條件的新技術(shù),檢測外周血白細(xì)胞內(nèi)的P<,210><'bcr/abl>蛋白,為臨床提供特異、靈敏、快速診斷慢性髓性白血病的新方法.方法是從外

3、周血中收集白細(xì)胞,采用SDS-PAGE分離出P<,210><'bcr/abl>微量蛋白,用Western blotting將分離的物質(zhì)轉(zhuǎn)移至NC膜上,與特異的ABL單克隆抗體結(jié)合形成抗原抗體結(jié)合物,用增強(qiáng)的免疫化學(xué)發(fā)光法(ECL)對區(qū)帶進(jìn)行處理,使其與發(fā)光的物質(zhì)作用產(chǎn)生強(qiáng)信號,對x光片曝光,結(jié)果陽性顯示清晰印跡.用我們建立的新方法,對68例符合FAB分型的CML患者進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果全部陽性,20例正常獻(xiàn)血員全部陰性,與美國M.D.An