同種異體脂肪干細(xì)胞組織工程骨修復(fù)管狀骨缺損.pdf

1、目的：脂肪干細(xì)胞（Adipose-Derived Stem Cell, ADSCs）因具有良好的成骨分化潛能而常被用來做為骨組織工程的種子細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)在脂肪干細(xì)胞提取、培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)分化所做工作的基礎(chǔ)上，建立兔尺骨缺損模型，進(jìn)一步探討同種異體脂肪干細(xì)胞組織工程骨修復(fù)管狀骨缺損的可行性。
　　方法：（1）獲取新西蘭大白兔的肩胛部脂肪，分離培養(yǎng)具有多向分化潛能的脂肪干細(xì)胞；（2）以成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng)的第3代細(xì)胞（P3）為實(shí)驗(yàn)組，LG-DM

2、EM作為對(duì)照組。DNA定量法測(cè)定細(xì)胞的增殖曲線、定性檢測(cè)堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase, ALP）及細(xì)胞外鈣鹽沉積情況；（3）P3兔ADSCs與脫鈣骨材料復(fù)合后，體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)（LG-DMEM設(shè)為對(duì)照）。用掃描電鏡對(duì)細(xì)胞-材料復(fù)合物的表面進(jìn)行觀察、DIO標(biāo)記細(xì)胞后采用激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況、定量檢測(cè)堿性磷酸酶及細(xì)胞外鈣離子；（4）制造兔兩側(cè)尺骨臨界大小（15mm長度）的缺損，分別植入兔ADSCs-脫鈣骨

3、復(fù)合物體（實(shí)驗(yàn)組）和單純脫鈣骨材料（對(duì)照組）；（5）12周后取樣本，行三維CT和組織學(xué)檢測(cè)，觀察成骨情況。
　　結(jié)果：兔ADSCs體外增殖能力強(qiáng)，且具有多向分化潛能；與脫鈣骨材料具有良好的細(xì)胞相容性；細(xì)胞材料復(fù)合物植入12周后，三維CT顯示實(shí)驗(yàn)組有新生骨基質(zhì)長成，對(duì)照組未見骨組織生成。組織學(xué)檢測(cè)顯示實(shí)驗(yàn)組缺損處被典型的骨組織取代，可見新生骨小梁附著于脫鈣骨表面，而對(duì)照組中只有少量的骨組織和纖維組織充填。
　　結(jié)論：通過正確的