利用液相芯片研究重型顱腦創(chuàng)傷大鼠23種炎性因子的變化及牛磺酸影響.pdf

1、目的：顱腦損傷(TBI)后的繼發(fā)性腦損害是導(dǎo)致腦損傷高病死率、高致殘率的重要原因，炎癥細(xì)胞因子可因過(guò)度激活引起強(qiáng)烈的全身性炎癥反應(yīng)而加重繼發(fā)性腦損傷。本實(shí)驗(yàn)旨在利用液相芯片技術(shù)檢測(cè)重型TBI大鼠腦組織中23種炎性因子的變化，并研究牛磺酸對(duì)TBI大鼠的23種炎性因子、腦水含量、星形膠質(zhì)細(xì)胞（GFAP）的影響，探討牛磺酸影響炎性因子表達(dá)的可能機(jī)制。
　　 方法：按隨機(jī)數(shù)字表法將96只雄性SD大鼠（280±20g）分為4組:假手術(shù)組(

2、Sham組)、腦外傷組(TBI組)、?；撬嶂委熃M(Tau組)，牛磺酸預(yù)防組(Pre-Tau組)、每組24只。后3組均采用液壓打擊法在大腦左頂部(前囟后4.5mm，矢狀縫左旁開(kāi)2.5mm處，骨窗直徑約為5mm)制作大鼠重型顱腦創(chuàng)傷模型(打擊力度1.8atm)。造模成功后即刻尾靜脈給藥200mg/kg，Sham組和TBI組給予相同量等滲鹽水，Pre-Tau組造模前4天每天尾靜脈給藥1次。分別在24h、7d后處死取腦。取創(chuàng)傷區(qū)旁半暗帶腦組織3

3、0mg，用于濕重法測(cè)量腦水含量。取創(chuàng)傷區(qū)腦組織130mg進(jìn)行腦組織勻漿后，離心取上清，采用Luminex MAGPIX檢測(cè)23種炎性因子(IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-13、IL-17、IL-18、G-CSF、TNF-α、IP-10、IFN-γ、MCP-1、Eotaxin、GM-CSF、Leptin、MIP-1α、GRO/KC、VEGF and RANTES）的含量。

4、其中每組隨機(jī)選取6只鼠腦，做石蠟切片，用免疫熒光的方法檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞(GFAP)的數(shù)量變化。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。
　　 結(jié)果：⑴腦水含量結(jié)果:與Sham組比較，24h/7d TBI組腦組織水含量均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。與TBI組比較，24h/7d Tau組及Pre-Tau組均較TBI組的腦水含量顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。⑵TBI后24h腦組織中23種炎性因子

5、變化:與Sham組比較，TBI組G-CSF、Leptin、MIP-1α、IL-1β、IL-6、IL-12p70、IL-5、IL-18、MCP-1、RANTES顯著上升;其余指標(biāo)沒(méi)有變化;與TBI組比較，Tau組顯著下降因子:MIP-1α、IL-4、IL-1β、IL-12p70、IL-18、RANTES。與TBI組比較，Pre-Tau組顯著下降因子:G-CSF，Leptin，MIP-1α。⑶TBI后7d腦組織中23種炎性因子變化:與Sha

6、m組比較，TBI組G-CSF, Eotaxin，IL-1α、Leptin、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-13、IL-12p70、IL-17、GRO/KC、TNF-α顯著上升;與TBI組比較，Tau組顯著下降指標(biāo):G-CSF、Eotaxin、IL-1α、Leptin、IL4、IL-1β、IL6、IL13、IL12p70、IFN-γ、IL-17、IP-10、VEGF、TNF-α;與TBI組比較，Pre-Tau組因子顯著下降

7、指標(biāo)同Tau組外，還有MIP-1α，IL-2，RANTES等指標(biāo)下降。⑷創(chuàng)傷區(qū)腦皮質(zhì)GFAP變化:7d后TBI組GFAP較Sham組顯著上升，與TBI組比較，Tau組7d后GFAP表達(dá)顯著降低;Pre-Tau組24h皮質(zhì)的GFAP表達(dá)量顯著下降，其他組無(wú)顯著區(qū)別。
　　 結(jié)論：①?；撬峋哂袦p輕大鼠重型顱腦損傷后腦水腫的作用。創(chuàng)傷前后給藥均能達(dá)到減輕腦水腫的作用。?；撬岬囊盅鬃饔靡部赡苁瞧湟种苿?chuàng)傷后腦水腫形成的機(jī)制之一。②大鼠TB

8、I后24h腦組織中G-CSF、Leptin、MIP-1α、IL-1β、IL-6、IL-12p70、IL-5、IL-18、MCP-1、RANTES顯著升高，牛磺酸可以使MIP-1α、IL-4、IL-1β、IL-12p70、IL-18、RANTES顯著下降。TBI后7d腦組織中G-CSF, Eotaxin,IL-1α、Leptin、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-13、IL-12p70、IL-17、GRO/KC、TNF-α顯

9、著上升，?；撬峥梢允笹-CSF、Eotaxin、IL-1α、Leptin、IL4、IL-1β、IL6、IL13、IL12p70、IFN-γ、IL-17、IP-10、VEGF、TNF-α顯著下降。?；撬峥赡芡ㄟ^(guò)抑制NF-κB的激活來(lái)減少炎性因子的過(guò)度表達(dá)，以發(fā)揮腦創(chuàng)傷后的抑炎作用。③牛磺酸預(yù)防給藥可以顯著降低大鼠腦創(chuàng)傷后初期膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá);隨時(shí)間延長(zhǎng)，?；撬嶂委熃M可以降低膠質(zhì)細(xì)胞的增生。?；撬峥赡芡ㄟ^(guò)抑制創(chuàng)傷后腦中星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖，減少