抑制miR-223表達增強雷公藤紅素抗MCF-7和PC3增殖作用.pdf

1、目的：雷公藤紅素是一種新型抗腫瘤藥物，深入研究其作用機制，從而提升其抗腫瘤效果，近來受到廣泛關(guān)注。本項目觀察在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中起重要作用的分子miR-223，對雷公藤紅素抑制腫瘤細胞增殖作用是否存在影響及可能機制。
　　方法：通過qRT-PCR、Western blot檢測人乳腺癌MCF-7細胞和人前列腺癌PC3細胞中miR-223的表達及蛋白的表達；采用流式細胞術(shù)法檢測兩種癌細胞的增殖情況。
　　結(jié)果：我們發(fā)現(xiàn)，雷公藤

2、紅素處理人乳腺癌MCF-7細胞和人前列腺癌PC3細胞6 h后，兩種腫瘤細胞miR-223表達明顯升高。下調(diào)或者過表達miR-223分別可促進或者抑制雷公藤紅素在兩種細胞的抗增殖作用。除誘導miR-223表達外，雷公藤紅素還能影響兩種細胞mTOR活性（加入雷公藤紅素后5 min mTOR活化升高，1 h后mTOR活性轉(zhuǎn)向被抑制）及促進 HSP70表達增加（通過激活 HSF-1）。有意思的是，mTOR活化、HSP70水平和miR-223表達

3、三者之間有相互依賴的關(guān)系，降低（或升高）其中的任何一項，另外兩項也降低（或升高）。最后，抑制mTOR或者降低HSP70表達，無論雷公藤紅素存在與否，均可抑制細胞增殖；表明mTOR活化和HSP70表達對細胞增殖很重要。
　　結(jié)論：本項目首次發(fā)現(xiàn)，在遭遇具有抗增殖作用的雷公藤紅素時，細胞至少可啟用三種“武器”（上調(diào)miR-223，早期活化mTOR以及誘導HSP70表達），對抗雷公藤紅素的抗增殖作用，以維持生存和增殖。與此對應(yīng)，下調(diào)mi