龍血素B與辣椒素受體交互作用的實驗與建模研究.pdf

1、影響中藥發(fā)展一個主要的原因是中藥的藥理作用機制很難用現(xiàn)代科學理論加以合理的解釋。揭示中藥藥理作用機制是開發(fā)新藥的基礎性工作之一。 我國傳統(tǒng)名貴中藥之一的血竭具有鎮(zhèn)痛作用，而且這種鎮(zhèn)痛作用可能部分是通過其成分龍血素B直接干預初級感覺神經元背根神經節(jié)(dorsal root ganglion，DRG)細胞電壓門控性鈉通道，阻礙痛覺信息傳人而產生的。另一方面龍血素B對三叉神經節(jié)(trigeminal ganglion，TG)細胞河豚毒

2、素不敏感型鈉通道電流的調制作用可能也是血竭參與顏面部鎮(zhèn)痛的內在機制。然而龍血素B除了對電壓門控性鈉通道具有調制作用可以干預痛覺信息傳入外，是否還通過其它途徑影響痛覺信息的中樞傳入呢？這是一個值得進一步探討的問題。 辣椒素是辣椒中的主要辛辣成分,可以通過激活感覺神經從而將傷害性刺激信息傳導至中樞,其受體--辣椒素受體(vanilloid receptor，VR1)在疼痛傳導過程中也具有相當重要的作用，它可被多種傷害性刺激(辣椒素、

3、H+和傷害性熱刺激)所激活，而且該受體通道與電壓門控性鈉通道一樣主要存在于初級感覺神經元上。龍血素B是否能夠通過影響辣椒素受體通道而成為干預痛覺信息傳入的的另一種原因呢，兩種調制作用之間是否存在著內在聯(lián)系也有待深入探討。 本文運用不同的方法和途徑研究中藥血竭的鎮(zhèn)痛機理，確定其成分龍血素B干預痛覺中樞信息傳入的具體藥理效應，為中藥血竭的鎮(zhèn)痛藥理研究提供了新的思路和方法。首先應用全細胞膜片鉗實驗技術觀察了龍血素B對大鼠背根神經節(jié)細胞

4、辣椒素誘發(fā)電流的反應，對辣椒素所引起的細胞膜去極化電位的影響以及對受體通道翻轉電位的作用，再采用Alexander I.Sobolevsky所提出受體與配體結合模型擬合膜片鉗實驗所得數(shù)據，估計龍血素B作用前后大鼠背根神經節(jié)細胞辣椒素誘發(fā)電流的參數(shù)。結果顯示，辣椒素受體拮抗劑辣椒卓平可以完全抑制辣椒素受體電流；龍血素B對辣椒素受體電流以及辣椒素所引發(fā)的細胞去極化電位具有濃度依賴性抑制作用；低濃度的龍血素B對電流和去極化膜電位幾乎沒有影響，

5、而高濃度的龍血素B幾乎完全抑制了受體電流和去極化膜電位；此外發(fā)現(xiàn)龍血素B對辣椒素受體通道的翻轉電位幾乎沒有影響；由擬合結果顯示龍血素B與辣椒素受體的相互作用符合簡單的一個配體和一個受體位點相結合的作用模式。 上述研究結果說明龍血素B除了能夠通過調制初級感覺神經元背根神經節(jié)細胞電壓門控性鈉通道，干預外周痛覺信息的中樞傳入產生鎮(zhèn)痛作用之外。還可能通過影響初級感覺神經元上的辣椒素受體通道而影響痛覺信息的傳遞。這也是血竭產生鎮(zhèn)痛作用的另

6、一種可能的藥理機制。此外，通過受體配體結合模型模擬結果發(fā)現(xiàn)龍血素B在辣椒素受體通道中僅有一個結合位點，龍血素B正是與其相結合而阻斷鈣離子等離子的內流從而抑制辣椒素所誘發(fā)電流的產生。因此龍血素B可能是通過影響初級感覺神經元背根神經節(jié)細胞電壓門控性鈉通道以及辣椒素受體通道的雙重作用而阻斷痛覺信息的傳入的。 在以前研究的基礎上，本研究闡明了龍血素B對電壓門控性鈉通道以及辣椒素受體通道的雙重作用從而影響痛覺信息的傳遞，導致血竭產生鎮(zhèn)痛作