根治性切除術后NSCLC預后和IV期NSCLC化療療效及預后的免疫分子預測.pdf

1、世界范圍內，肺癌的發(fā)病率和死亡率逐年上升，已經成為腫瘤相關死亡的主要原因；在我國，肺癌死亡率從上世紀70年代的7.17/10萬，上升到21世紀初的26.7/10萬，已經成為威脅人民生命健康的重大疾病。
　　在原發(fā)性肺癌中，約80-90％為非小細胞肺癌。
　　肺癌的治療主要采用手術、放療、化療、分子靶向等綜合治療，正如其他一些惡性腫瘤一樣，手術仍然是目前有可能治愈肺癌的手段之一，但是，這樣治愈肺癌的基礎治療手段僅僅適用于早期病

2、人，即使IA病例，其根治術后5年生存率也只有67%左右，而且大約40%的病人會出現(xiàn)術后復發(fā)。進展期肺癌治療以放化療為主，中位生存時間約8-10個月，5年總體生存率低于15%。
　　化療作為全身性治療手段，具有不可替代的作用，但在臨床實踐中也面臨著許多困擾和挑戰(zhàn)。伴隨著一系列大型、Ⅲ期臨床研究結果的公布，NSCLC術后輔助化療的價值得以肯定。目前達成的基本共識是：根治術后患者、鉑類為基礎的輔助化療能夠提高生存率，而早期患者獲益較少。

3、也就是說，依據(jù)循證醫(yī)學的結果選擇輔助化療是合理的，但僅僅依據(jù)病理類型及臨床分期等顯然具有局限性。目前我們尚沒有發(fā)現(xiàn)可靠的分子生物學指標，能夠預測哪一類患者可以從輔助化療中獲益。
　　鉑類為基礎聯(lián)合新藥的化療是局部晚期及進展期NSCLC的一線治療方案，為我們廣泛接受，第三代抗癌藥明顯提高了化療療效，但一線方案的有效率僅30%-40%，目前相關評價指標尚缺乏預測一線化療療效及預后情況的能力。
　　惡性腫瘤的發(fā)展受復雜的生物系統(tǒng)的

4、調控，取決于基因異常，腫瘤細胞、間質細胞以及宿主炎癥細胞之間的相互關系。在腫瘤發(fā)生，發(fā)展過程中，改變的炎癥反應和免疫反應起著關鍵的作用，越來越多的資料表明：依據(jù)腫瘤微環(huán)境差異,腫瘤相關的免疫反應更多地是促進腫瘤的生長，進展和免疫抑制作用，遠遠超過了有效的抗腫瘤反應。
　　迄今為止，TNM分期系統(tǒng)仍然是最強有力地預測 NSCLC生存的指標，分子生物學方面，不同的因子均涉及NSCLC的發(fā)生及發(fā)展，因此，它們有可能作為預測預后及治療反應

5、的標志物。
　　基于上述原因，全面了解NSCLC患者的局部免疫狀態(tài)，與預后的關系，篩選出復發(fā)轉移高風險人群及化療受益人群，有可能提高化療療效。
　　個別因子影響NSCLC預后的報道較多，但是較大規(guī)模地、系統(tǒng)性地研究免疫相關因子對于NSCLC預后及輔助化療療效的較少，對于IV期NSCLC預后及化療療效預測除本研究之外，國內外未見報道。
　　第一部分、非小細胞肺癌根治性切除術后患者的臨床病理特點和預后相關因素分析
　

6、　材料與方法：
　　1．收集2004年1月至2007年1月間收治的129例根治性手術的NSCLC病例，其臨床病理資料完整，隨訪結果明確。
　　2．回顧性分析129例患者臨床病理特征與總生存（OS），無疾病生存時間（DFS）的關系；
　　3．回顧性分析92例術后接受輔助化療患者的臨床病例特征與 OS及 DFS的關系。
　　4．統(tǒng)計學處理：采用SPSS l2.0軟件包，分類變量的比較用Pearson’sχ2檢驗；有序

7、變量之間的相關性檢驗用Spearman等級相關分析，生存分析選用Kaplan-Meier方法，單因素顯著性檢驗采用Log-rank方法，多因素生存分析采用COX風險比例模型，各項指標均以P<0.05具有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1．全組中位隨訪時間36個月（6-109個月）。至研究隨訪終止時間2013年3月31日，129例患者中82例(占63.6%)死亡，47例（36.4%）存活，中位OS為34.0個月，中位DFS為17

8、.0個月。單因素分析顯示：年齡、性別、是否吸煙及是否接受輔助化療與DFS、OS均無關(P＞0.05)。腺癌、pT分期、pN分期及 TNM分期早的患者，DFS、OS均較好(P＜0.01)。多因素分析顯示：病理類型（P=0.006），pT分期（P=0.000），pN分期（P=0.018）是影響OS獨立預后因素；而病理類型(P=0.002)，pT分期（P=0.006）是影響DFS的獨立預后因素。
　　2．92例接受術后輔助化療，其中有6

9、1例（占該組66.3%）死亡，31例（占該組33.7%）仍存活，中位OS為34.0個月，中位DFS為17.0個月。單因素分析顯示：年齡、是否吸煙與DFS、OS均無相關(P＞0.05)。pT分期、pN分期及TNM分期早的患者，DFS、OS均較好(P＜0.01)，不同病理類型OS不同，組間存在差異（P<0.05）；多因素分析顯示：病理類型（P=0.032），pT分期（P=0.006）是影響OS的獨立預后因素，而pT分期（P=0.006），p

10、N分期（P=0.018）， TNM分期（P=0.005）是影響DFS的獨立預后因素。
　　第二部分、腫瘤微環(huán)境免疫分子表達對NSCLC根治性切除術后預后的意義
　　材料和方法
　　1．選取129例非小細胞肺癌根治術后的組織標本，臨床病理特征如前面所述，應用免疫組化法檢測腫瘤組織標本中CD3、CD4、CD8、IL-2、IL-6、TGF-β1、TNF-α、APRIL、COX-2、Survivin等表達情況。
　　2．

11、分析各項指標的表達情況與臨床病理特征及與DFS，OS的關系；同樣的方法分析接受術后輔助化療患者上述相關免疫指標的表達情況，其臨床病例特征與生存的關系。
　　3．統(tǒng)計學處理：以中位數(shù)作為劃分標準，評分>中位數(shù)的作為高表達組，評分≤中位數(shù)作為低表達組。采用SPSS l2.0軟件包，相關性分析采用卡方檢驗，生存分析選用Kaplan-Meier方法，單因素顯著性檢驗采用Log-rank方法，多因素生存分析采用COX風險比例模型，各項指標均

12、以P<0.05具有統(tǒng)計學意義。
　　結果
　　1．術后標本中 CD3高表達（P=0.002）、CD4低表達（P=0.000），CD8低表達（P=0.000）、IL-2高表達（P=0.000）者OS較長；CD8低表達（P=0.002）、TNF-α低表達（P=0.035）者DFS較長。多因素分析顯示CD3（P=0.000）、CD4（P=0.019）和CD8（P=0.000）的表達強度是影響NSCLC根治切除術后OS的獨立預后因素

13、，而CD8的表達強度（P=0.011）是影響NSCLC術后DFS的獨立預后因素。
　　2．92例接受術后輔助化療，CD3高表達（P=0.017），CD4低表達（P=0.003）， CD8低表達（P=0.022），IL-2高表達（P=0.002），Survivin低表達（P=0.045）患者OS較長；而CD8低表達（P=0.011）、Survivin低表達（P=0.05）患者DFS較長。多因素分析顯示，CD3（P=0.002）、CD

14、8（P=0.009）和Survivin（P=0.030）的表達強度是影響OS的獨立預后因素，而CD8表達強度（P=0.002）和Survivin表達強度（P=0.036）是影響DFS的獨立預后因素。
　　第三部分、Ⅳ期NSCLC T淋巴細胞和IL-2表達及一線化療療效及生存分析
　　材料和方法
　　1．收集我院2004年1月~2007年3月間收治的Ⅳ期NSCLC病例，共169例，均經細胞學和/或病理組織學檢查確診，所有

15、病例均具有詳細的臨床病理資料和隨訪資料。
　　2．針對活檢標本進行分析，免疫組化方法檢測腫瘤浸潤淋巴細胞（ TIL， Tumor-infiltrating lymphocytes）和白介素-2（Interleukin-2）表達情況。
　　3．回顧性分析TIL和IL-2表達與臨床病理特征、一線化療近期療效及OS的關系。
　　4．統(tǒng)計學處理：采用SPSS l2.0軟件包，TIL和IL-2與臨床病理學特征間的關系采用相關性分

16、析Spearman’s檢驗，變量間的比較采用卡方檢驗或Fisher’s精確卡方檢驗，生存分析選用Kaplan-Meier方法，單因素顯著性檢驗采用Log-rank方法，多因素生存分析采用COX風險比例模型，各項指標均以P<0.05具有統(tǒng)計學意義。
　　結果
　　1．CD4低表達（P=0.006）、CD8低表達（P=0.001）一線化療臨床獲益率高于高表達組，而IL-2低表達（P=0.030）臨床獲益率低于高表達組。
　

17、　2．單因素分析顯示：女性（P=0.012），cT分期早（P=0.000）及cN分期早（P=0.004），及轉移臟器個數(shù)少（P=0.000）者OS長，COX分析顯示cT分期（P=0.006）及性別（P=0.002）是影響OS的獨立預后因素。
　　3．在免疫相關分子表達上，CD4低表達（P=0.000）及IL-2高表達（P=0.001）者OS較好，而多因素分析顯示CD4表達（P=0.001）及IL-2表達（P=0.031）是影響OS

18、的獨立預后因素。
　　結論
　　1．病理類型，pT分期，pN分期是影響術后患者OS的獨立預后因素；而病理類型和pT分期是影響術后輔助化療OS的獨立預后因素。
　　2．NSCLC行根治性切除術后患者，腫瘤局部組織中CD3、CD4和CD8的表達強度是影響OS的獨立預后因素，而在接受輔助化療患者中，CD3、CD8和Survivin的表達強度是影響OS的獨立預后因素。
　　3．Ⅳ期NSCLC患者，cT分期及性別是影響OS