PNPLA3基因I148M過表達(dá)Huh7細(xì)胞中SREBP-1c與甘油三酯的關(guān)系.pdf

1、目的:
　　探討PNPLA3基因I148M過表達(dá)Huh7細(xì)胞中SREBP-1c與甘油三酯的關(guān)系。為非酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制研究提供線索。
　　方法:
　　用空病毒和攜帶PNPLA3基因I148M突變型的慢病毒感染Huh-7細(xì)胞，構(gòu)建空病毒組（對照組）和PNPLA3基因1148M突變型組（突變組）。分別用油紅O染色顯示細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量變化，全自動生化分析儀測定各組細(xì)胞中甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AL

2、T)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量，熒光定量PCR測定SREBP-1c mRNA的水平變化。Western Blot檢測SREBP-1c蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　油紅O染色顯示突變組中甘油三酯含量增加。突變組的甘油三酯和總膽固醇含量明顯升高，分別為（0.54±0.03）mmol/L和（0.28±0.03）mmol/L，高于對照組的（0.23±0.02）mmol/L和（0.13±0.02）mmol/L（t值分別為22.58

3、和11.83，P值均＜0.01）。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶也有同樣的表現(xiàn)，分別為（92±10）U/L和(279±12)U/L，明顯高于（170±10)U/L和（585±12）U/L，P值均＜0.01，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。SREBP-1c mRNA表達(dá)量增加，與對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.01。SREBP-1 c蛋白也較對照組有所增加。突變組SREBP-1c與甘油三酯呈正相關(guān)(r=0.912，P＜0.01)，與膽固醇也有一定的相關(guān)