不同濃度軟脂酸對(duì)INS-1細(xì)胞功能與凋亡的動(dòng)態(tài)影響及SREBP-1c基因的變化.pdf

1、目的:觀察不同濃度軟脂酸在體外對(duì)胰島INS-1細(xì)胞功能活性與凋亡的影響及SREBP-1c的基因變化。
　　 方法:培養(yǎng)INS-1細(xì)胞,將在生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期的細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組加入含不同濃度(100μmol/l、200μmol/l、300μmol/l、400μmol/l)軟脂酸的培養(yǎng)基,對(duì)照組加入不含軟脂酸的培養(yǎng)基。各組細(xì)胞在相同條件下培養(yǎng)6h,24h,使用MTT監(jiān)測(cè)細(xì)胞數(shù)目及活力,碘化丙啶(PI)單染后經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞

2、凋亡率及周期,用半定量RT-PCR檢測(cè)觀察insulin、SREBP-1c、insig-1mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果:胰島INS-1細(xì)胞經(jīng)100μmol/l、200μmol/l、300μmol/l、400μmol/l濃度的軟脂酸干預(yù)6h后,細(xì)胞功能活性、細(xì)胞凋亡率與對(duì)照相比無明顯差別(P>0.05),100μmol/l、200μmol/l、300μmol/l軟脂酸干預(yù)后基礎(chǔ)胰島素分泌量較對(duì)照組增加(P<0.05),400μmo

3、l/l軟脂酸干預(yù)后與對(duì)照組無明顯差異,insulin mRNA的表達(dá)無明顯變化。而經(jīng)軟脂酸干預(yù)24h時(shí),細(xì)胞活力和數(shù)目與對(duì)照組相比下降,細(xì)胞凋亡率明顯增加,且隨著軟脂酸濃度的增加,胰島INS-1細(xì)胞基礎(chǔ)胰島素分泌量減少,insulin mRNA表達(dá)下調(diào),SREBP-1c、insig-1 mRNA表達(dá)無明顯變化。
　　 結(jié)論:短期低濃度軟脂酸促INS-1細(xì)胞胰島素分泌,對(duì)凋亡無明顯影響；長(zhǎng)期軟脂酸干預(yù),影響INS-1細(xì)胞功能、促進(jìn)