化療藥物聯(lián)合光動力療法對人宮頸癌Hela細(xì)胞殺傷作用的研究.pdf

1、宮頸癌是女性常見的惡性腫瘤。在我國,由于患者自我保健意識的缺失和早期診斷方法普及難度大,很多患者治療時已經(jīng)到了晚期,同時近年呈現(xiàn)年齡趨于年輕化的特點。光動力療法(PDI)是近年來逐漸興起的一種有效、安全、副作用小、可協(xié)同性和重復(fù)性高,而且成本相對較小的一種淺表腫瘤治療方法,為部分宮頸癌及癌前病變患者提供了另外一種可選擇的治療手段。5-氨基酮戊酸(5-ALA)是第二代的光敏劑,克服了第一代光敏劑在體內(nèi)存留時間長的缺點,適合應(yīng)用于宮頸癌的臨

2、床治療。但光毒作用限制了光敏劑的用量,使得光動力療法的效果受到限制。順鉑(cisplatin)是宮頸癌臨床上最常用的化療藥物。拓?fù)涮婵?topotecan)是一種廣譜的抗腫瘤藥物,和順鉑聯(lián)合應(yīng)用已有實驗證實可以增強(qiáng)對癌細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。但是由于腫瘤細(xì)胞耐藥性和毒副作用,化療藥物對宮頸癌的治療效果有待進(jìn)一步提高。血紅素氧合酶(HO)是生物體內(nèi)催化血紅素分解的限速酶。近年來發(fā)現(xiàn)血紅素氧合酶-1(HO-1)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),并有研究證

3、明HO-1有抗凋亡的功能。
　　 本實驗旨在研究聯(lián)合應(yīng)用化療藥物和光動力療法能否提高對宮頸癌Hela細(xì)胞的殺傷作用及其作用機(jī)理。
　　 目的:探討順鉑、拓?fù)涮婵德?lián)合光動力治療對人宮頸癌細(xì)胞株Hela的殺傷作用及細(xì)胞凋亡的機(jī)理。
　　 方法:將人宮頸癌細(xì)胞株Hela細(xì)胞分為空白對照組(control)、單純光動力治療組(PDT組)、順鉑加拓?fù)涮婵到M(DDP-TPT組)、順鉑加光動力治療組(DDP-PDT組)、拓?fù)涮?/p>

4、康加光動力治療組(TPT-PDT組)以及順鉑和拓?fù)涮婵导庸鈩恿χ委熃M(DDP-TPT-PDT組)。5-ALA的實驗濃度為1mmol/L,激光的強(qiáng)度為5J/cm2?？瞻捉M僅接受5J/cm2的激光照射,DDP組順鉑的劑量為10mg/L,TPT組拓?fù)涮婵档膭┝?.4mg/L。DDP-TPT組,DDP-TPT-PDT組順鉑的劑量為5mg/L,拓?fù)涮婵档膭┝繛?.2mg/L。各組均避光孵育,力求其他實驗條件相同。噻唑藍(lán)MTT法檢測六組Had細(xì)胞的

5、增殖抑制情況。流式細(xì)胞儀(FCM)檢測PDT組、DDP-PDT組、TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組Hela細(xì)胞的凋亡情況。免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)法檢測PDT組、DDP-PDT組、TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組Hela細(xì)胞內(nèi)HO-1的表達(dá)情況。金氏法檢測單純化療組(DDP-TPT組)和光動力療法(PDT組)對Hela細(xì)胞的增殖抑制情況是否有協(xié)同效應(yīng)。
　　 結(jié)果:PDT組、DDP-PDT組、TPT-PDT組以

6、及DDP-TPT-PDT組對Hela細(xì)胞均有明顯的增殖抑制作用和誘導(dǎo)凋亡作用;DDP-PDT組、TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組對Hela細(xì)胞的增殖抑制和Hela細(xì)胞凋亡的程度明顯強(qiáng)于PDT組;PDT組,DDP-PDT組,TPT-PDT組和DDP-TPT-PDT組均可顯著抑制Hela細(xì)胞中HO-1的表達(dá),細(xì)胞中HO-1表達(dá)的下降趨勢也與處理組對Hela細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡趨勢相一致。PDT組和DDP-TPT組對Hela細(xì)胞的抑制作用