GABAB受體激活對(duì)U87-MG細(xì)胞生長(zhǎng)的影響.pdf

1、GABAB受體，作為GABA受體的三種受體之一，廣泛地分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中。代謝性GABAB受體是G蛋白偶聯(lián)受體C家族的成員，由GABAB1和GABAB2兩個(gè)亞基組成，GABAB1亞基的胞外區(qū)包含GABAB受體激動(dòng)劑結(jié)合位點(diǎn)，GABAB2亞基的跨膜區(qū)可以結(jié)合別構(gòu)調(diào)節(jié)劑，如CGP7930。GABAB2亞基的胞內(nèi)區(qū)主要負(fù)責(zé)結(jié)合G蛋白。
　　有趣的是，在一些人的癌細(xì)胞和組織中檢測(cè)到了GABAB受體表達(dá)量的增加，另外，據(jù)報(bào)道，GABAB受

2、體特異性激動(dòng)劑baclofen抑制了許多癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，如胃癌、小呼吸道肺癌以及人肝癌，這些都暗示著GABAB受體在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中可能具有潛在的作用。
　　腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)瘤中發(fā)病率比較高的一類(lèi)腫瘤，約占其46％。但是傳統(tǒng)的細(xì)胞毒性化療藥物并無(wú)特異性。FAK、ERK1/2和 AKT是細(xì)胞中非常重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。Failly等發(fā)現(xiàn)ERK和AKT在體外腦膠質(zhì)瘤的細(xì)胞存活，抗凋亡過(guò)程中有重要的作用。另外，據(jù)報(bào)道，F(xiàn)AK的表達(dá)量和腦膠質(zhì)瘤

3、惡性程度具有正相關(guān)性。
　　本文以腦膠質(zhì)瘤U87-MG細(xì)胞為研究對(duì)象，初步探討了GABAB受體的激活對(duì)該細(xì)胞的細(xì)胞效應(yīng)和信號(hào)通路的影響，用GABAB受體激動(dòng)劑baclofen長(zhǎng)時(shí)間處理腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)baclofen對(duì)U87-MG細(xì)胞具有抑制作用。為了探討這種抑制作用的機(jī)制，用baclofen處理U87-MG細(xì)胞，免疫印跡結(jié)果顯示AKT的磷酸化程度降低，但是 caspase-3并沒(méi)有發(fā)生剪切，說(shuō)明 GABAB受體的激活對(duì)細(xì)胞的抑

4、制作用可能依賴(lài)于AKT磷酸化水平降低且未引起細(xì)胞凋亡。但是，與已報(bào)道的肝癌、肺癌的抑制作用相比，該抑制作用并不顯著，為了查明這一現(xiàn)象的原因，用U0126（ERK1/2抑制劑）和baclofen長(zhǎng)時(shí)間處理細(xì)胞，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的活力。結(jié)果卻發(fā)現(xiàn)：當(dāng)U0126濃度為10μM的時(shí)候，GABAB受體的激活對(duì)ERK1/2磷酸化水平降低而引起的細(xì)胞抑制作用并沒(méi)有提高。當(dāng)U0126濃度為100nM的時(shí)候，baclofen的處理組對(duì)該腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞抑制

5、具有一定的恢復(fù)作用。為了解釋這一現(xiàn)象，用激動(dòng)劑baclofen和U0126（100 nM）對(duì)細(xì)胞進(jìn)行了短時(shí)間處理時(shí)，發(fā)現(xiàn)p-ERK仍有激活。這一結(jié)果表明這種保護(hù)作用可能由p-ERK的激活所調(diào)節(jié)。
　　另?yè)?jù)免疫印跡結(jié)果顯示：當(dāng)用PF573228（10μM）處理細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)p-ERK1/2不能被baclofen激活，當(dāng)PF573228濃度降到100 nM時(shí)，發(fā)現(xiàn)p-ERK1/2又可被baclofen激活，說(shuō)明p-FAK在ERK的磷酸化