Rg1通過抑制破骨細胞的分化與成熟保護小鼠關節(jié)的機制研究.pdf

1、目的：已有實驗表明Rg1通過抑制組織的炎性反應，保護組織的結構與功能，但其機制尚不清楚。本研究通過Rg1抑制RANKL誘導RAW264.7細胞分化為破骨細胞的體外實驗和Rg1抑制膠原誘導關節(jié)炎（CIA）小鼠骨關節(jié)炎的體內實驗，探索Rg1抑制骨關節(jié)炎的機制。
　　方法：體外實驗:培養(yǎng)由RANKL誘導小鼠骨髓來源的RAW264.7細胞形成的破骨細胞，使用不同濃度Rg1，檢測破骨細胞形成后抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性和骨吸收面積

2、;RT-PCR檢測破骨細胞功能性基因TRAP、CTSK、CTR、MMP-9的表達;RT-PCR，Western blot檢測破骨分化轉錄因子c-Fos、c-Jun、NFATc1的表達以及破骨細胞信號通路NF-κB、MAPK的磷酸化水平。體內實驗:CIA小鼠腹腔注射Rg1或安慰劑，對小鼠關節(jié)炎的嚴重程度進行評分，關節(jié)軟骨行HE染色;阿辛藍染色及TRAP染色，觀察Rg1對CIA小鼠關節(jié)軟骨的破壞及體內破骨細胞分化與成熟的影響。
　　結

3、果：體外實驗:Rg1呈現(xiàn)濃度依賴性地抑制由RANKL誘導的破骨細胞抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的活性，破骨細胞的數(shù)量和破骨細胞的骨吸收面積;同時Rg1顯著抑制RANKL誘導的TRAP，CTSK，MMP9，CTR的基因表達，抑制RANK信號通路中NF-κB p65及MAPK(ERK、JNK、p38)磷酸化水平及相關轉錄因子c-Fos，c-Jun，NFATc1的表達。體內實驗:Rg1能顯著降低CIA小鼠的關節(jié)炎評分，控制關節(jié)炎的炎性癥狀。