KLF4在人結(jié)直腸腫瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：結(jié)直腸腫瘤是我國最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于肺癌、胃癌和肝癌。隨著飲食結(jié)構(gòu)和生活環(huán)境的變化，我國結(jié)直腸癌的發(fā)病率從60年代的0.06‰，猛增到90年代的0.24‰?，F(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，不斷有新的診斷和治療手段出現(xiàn)，但是，結(jié)直腸癌的預(yù)后不容樂觀，仍有較高復(fù)發(fā)率。隨著對腫瘤基因水平的研究，目前認(rèn)為結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展可能始于正?；虻膿p傷、癌基因的激活或者抑癌基因的失活。其中，真核生物鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子Krüppel-likefac

2、tor4(KLF4)，通過激活或者抑制目的基因的轉(zhuǎn)錄來調(diào)控基因表達(dá)的時間特異性和組織特異性，在細(xì)胞生長、分化及凋亡等過程中發(fā)揮重要作用。本文主要探討了KLF4在結(jié)直腸腫瘤中表達(dá)的變化，并分析其表達(dá)變化與臨床參數(shù)間的關(guān)系。 方法：1.應(yīng)用組織微陣列結(jié)合免疫組織化學(xué)S-P法，檢測77例結(jié)直腸癌組織，40例癌旁組織和7例腺瘤組織中KLF4的表達(dá)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。判斷標(biāo)準(zhǔn)：由兩位有經(jīng)驗的病理專家對結(jié)果進(jìn)行評定。KLF4蛋白在石蠟

3、切片中陽性表達(dá)主要定位于細(xì)胞質(zhì)，呈棕黃色顆粒。根據(jù)腫瘤細(xì)胞顯色的比例及染色強(qiáng)度，對KLF4表達(dá)做半定量判定。按陽性細(xì)胞率評分：陽性細(xì)胞數(shù)占11％～50％為2分；51％～80％為3分；＞80％為4分。按顯色程度評分：染色弱為1分；中等染色為2分；強(qiáng)染色為3分。將兩種評分結(jié)合起來分4級：無論染色強(qiáng)度如何，細(xì)胞陽性率≤l0％為陰性(-)；評2或3分為弱陽性(+)；評4～7分為強(qiáng)陽性(++～+++)。2.采用手術(shù)切除結(jié)直腸良惡性腫瘤組織，以距腫

4、瘤10cm以上的正常黏膜作為對照，通過WesternBlot方法，以β-actin為內(nèi)對照，檢測KLF4在新鮮結(jié)直腸腫瘤組織與正常黏膜組織中的表達(dá)，實驗結(jié)果用Image-proplusVersion5.0.1圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行灰度值測定。3.采用SPSS10.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行分析，對KLF4的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系采用x2檢驗，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果：1.免疫組織化學(xué)：(1)在77例結(jié)直腸癌組織中KLF4的陽性表達(dá)

5、率為76.62％(59/77)，癌旁形態(tài)學(xué)正常的結(jié)直腸黏膜可見KLF4高表達(dá)；強(qiáng)陽性率在正常黏膜、腺瘤、高分化、中分化癌中分別為57.5％、57.14％、37.5％、21.4％，低分化癌無強(qiáng)陽性表達(dá)，其表達(dá)率與腫瘤分化程度顯著相關(guān)(P＜0.01)。(2)KLF4表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤位置、浸潤深度、是否轉(zhuǎn)移、大體類型以及臨床Dukes分期無顯著相關(guān)(P＞0.05)。2.蛋白印跡：Image-proplusVersion5.0.1圖像