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文檔簡介
1、目的:
脂肪干細(xì)胞是目前骨組織工程研究中的一種重要種子細(xì)胞。因而,直接凍存作為骨組織工程用的細(xì)胞/支架復(fù)合物,顯得尤為重要。目前,玻璃化凍存是凍存細(xì)胞/支架復(fù)合物的最有前景的凍存方法之一。因而,開發(fā)出一種由海藻糖和二甲亞砜為主要組分的新型的、有效的凍存液,對保存細(xì)胞/支架復(fù)合物顯得尤為重要。希望通過改善凍存液的組成和預(yù)處理條件來增強(qiáng)對脂肪干細(xì)胞/支架復(fù)合物的玻璃樣凍存的效果。
方法:
首先制備出由人脂肪干細(xì)
2、胞與脫鈣骨結(jié)合形成組織工程骨。經(jīng)過1周的成骨誘導(dǎo)后,進(jìn)行玻璃化凍存。在凍存的1周后,對凍存的脂肪干細(xì)胞/支架復(fù)合物進(jìn)行常規(guī)復(fù)蘇。觀察復(fù)蘇后第3天的細(xì)胞成活率,成骨基因ALP,OCN的表達(dá),并運用多響應(yīng)優(yōu)化分析法,確定海藻糖和二甲基亞砜的最佳配比。
結(jié)果:
新開發(fā)的玻璃化凍存液的最優(yōu)組成是:二甲基亞砜(v/v)30%,海藻糖0.8molL-1,LG-DMEM(v/v)70%。
結(jié)論:
基于以上結(jié)果分
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