營養(yǎng)水平對初產(chǎn)母豬妊娠早期胚胎存活和Leptin分泌及基因表達的影響.pdf

1、本研究以初產(chǎn)母豬為試驗動物，研究營養(yǎng)水平對妊娠早期胚胎存活和瘦素(Leptin)分泌量及基因mRNA表達量的影響。試驗選取日齡和體重(113.40±9.58kg)相近的長白×大白雜交初產(chǎn)母豬63頭，配種后隨機分到三個營養(yǎng)水平組(高、中、低水平)中，各營養(yǎng)水平組母豬每天的飼喂量分別為2.0倍、1.2倍和0.6倍的維持需要，每個營養(yǎng)水平組3個重復，每個重復7頭豬。分別在母豬妊娠12天、25天和35天稱重、取血和屠宰取樣。然后通過酶聯(lián)免疫法(

2、ELISA)測定母豬血清及子宮沖洗液中的Leptin濃度，同時使用實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(Real Time-quantitativeRT-PCR)的方法研究胚胎中Leptin、瘦素受體(obR)、信號傳導與轉(zhuǎn)錄活化因子-3(STAT3)以及DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-1(DNMT1)基因mRNA的表達量。試驗結(jié)果如下： 1、營養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期的胚胎存活率。在母豬的各妊娠階段(妊娠12天、25天和35天)，中營養(yǎng)水

3、平組的胚胎存活率顯著高于高營養(yǎng)水平組和低營養(yǎng)水平組(P<0.05)，而高營養(yǎng)水平組和低營養(yǎng)水平組之間的胚胎存活率差異不顯著(P>0.05)。 2、營養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期Leptin的分泌量。母豬妊娠第12天時，高營養(yǎng)水平組血清和子宮沖洗液中Leptin濃度顯著高于中營養(yǎng)水平組(P<0.05)，極顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.01)。母豬妊娠25和35天時，高營養(yǎng)水平組血清和子宮沖洗液中Leptin濃度極顯著高于中、低營

4、養(yǎng)水平組(P<0.01)；中營養(yǎng)水平組血清中Leptin濃度極顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.01)；中營養(yǎng)水平組子宮沖洗液中Leptin濃度與低營養(yǎng)水平組之間差異不顯著(P>0.05)。母豬妊娠12、25和35天時，血清和子宮沖洗液中Leptin濃度與母豬采食量呈極顯著的線性增加(P<0.01)；妊娠25天、35天血清中Leptin濃度與母豬屠宰體重呈極顯著的線性增加(P<0.01)。妊娠期初產(chǎn)母豬Leptin的分泌量不斷增加。同一營養(yǎng)

5、水平下，隨著妊娠時間的延長，母豬血清中Leptin的濃度呈逐漸增加的趨勢(P<0.05)。 3、營養(yǎng)水平影響早期胚胎中Lepfin、obR、STAT3和DNMT1基因mRNA的表達量。在母豬妊娠各階段(妊娠12天、25天和35天)，不同營養(yǎng)水平組胚胎中各基因的表達(相對于H2A)結(jié)果如下： 母豬妊娠12天時，高營養(yǎng)水平組Leptin基因mRNA的表達量極顯著高于中、低營養(yǎng)水平組(P<0.01)，而中、低營養(yǎng)水平組間差異不

6、顯著(P>0.05)；高營養(yǎng)水平組obR基因rnRNA的表達量極顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.01)，DNMT1基因mRNA的表達量顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.05)，而中水平組與高、低營養(yǎng)水平組差異都不顯著(P>0.05)；高營養(yǎng)水平組STAT3基因mRNA的表達量極顯著高于中、低營養(yǎng)水平組(P<0.01)，中水平組顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.05)。母豬妊娠25天時，高營養(yǎng)水平組Leptin基因mRNA的表達量極顯著高于中、低營

7、養(yǎng)水平組(P<0.01)，obR基因mRNA的表達量顯著高于中、低營養(yǎng)水平組(P<0.05)，而后兩者差異不顯著(P>0.05)；高、中營養(yǎng)水平組STAT3基因mRNA的表達量差異不顯著(P>0.05)，高營養(yǎng)水平組極顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.01)，而中營養(yǎng)水平組顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.05).高、中營養(yǎng)水平組DNMT1基因mRNA的表達量極顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.01)，同時高營養(yǎng)水平組顯著高于中營養(yǎng)水平組(P<0.

8、05)。 母豬妊娠35天時，高營養(yǎng)水平組Leptin和DNMT1基因mRNA的表達量顯著高于中營養(yǎng)水平組(P<0.05)，Leptin基因mRNA的表達量極顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.01)，而DNMT1基因mRNA的表達量中、低營養(yǎng)水平組差異不顯著(P>0.05)；高營養(yǎng)水平組obR基因mRNA的表達量顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.05)，而中水平組與高、低營養(yǎng)水平組差異都不顯著(P>0.05)；高、中營養(yǎng)水平組STAT3基

9、因mRNA的表達量極顯著高于低營養(yǎng)水平組(P<0.01)，而前兩者差異不顯著(P>0.05)。 結(jié)論： 1、營養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期的胚胎存活率。在妊娠35天前給母豬飼喂1.2倍維持需要的飼糧能獲得較高的胚胎存活率。而高營養(yǎng)水平飼喂和嚴重限飼都會導致早期胚胎存活率降低。 2、營養(yǎng)水平顯著影響初產(chǎn)母豬妊娠早期血清和子宮沖洗液中Leptin的分泌量。母豬血清和子宮沖洗液中Leptin的濃度均隨營養(yǎng)水平的增加而

10、升高，且與母豬采食量和屠宰體重正相關。同一營養(yǎng)水平下，隨著妊娠時間的延長母豬血清中Leptin的濃度逐漸升高。過高過低的Leptin分泌對胚胎的發(fā)育不利。 3、母豬妊娠早期的營養(yǎng)水平顯著影響早期胚胎中Leptin、obR、STAT3和DNMT1基因mRNA的表達。高營養(yǎng)水平(2倍維持需要)上調(diào)這些基因在胚胎中的表達量，低營養(yǎng)水平(0.6倍維持需要)下調(diào)這些基因在胚胎中的表達量。嚴重限飼引起胚胎中Levtin、obR、STAT3和